菌株Pigmentiphagasp. H8中orf3311介导3-溴-4-羟基苯甲酸的降解开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

课题的意义、国内外研究进展、应用前景等（列出主要参考文献）1本课题研究意义1．1 研究背景及意义卤代芳烃类化合物具有稳定性好、耐疲劳、阻燃、耐热等特性，广泛用于工农业生产，如农药、染料、医药、化学中间体、助溶剂、合成材料等[1, 2]。

这些卤代化合物通过各种途径进入水体、大气和土壤环境，造成全球性的环境污染[3]。

由于卤素的电负性强，其与碳原子形成很强的共价键，增加在环境中的持久性，这也是大多数卤代化合物被列为持久性有机污染物（persistent organic pollutants, pops）和优先控制污染物（priority pollutants）的原因[4,5]。

4. 研究创新点

阐明菌株H8降解3-溴-4-羟基苯甲酸新的代谢途径，并克隆出降解关键酶基因。

5. 研究计划与进展

5．1 研究计划2017/05-2017/09 菌株h8降解bhb的代谢途径分析。

2017/10-2018/02 降解基因的克隆：将菌株h8的基因组dna送至专业的测序公司测序，并对数据进行比对分析，预测与bhb降解相关的基因；转座子随机插入突变文库的构建，筛选代谢缺陷型的克隆子，寻求bhb的降解基因；尝试通过降解酶的分级纯化，获得较纯的有活力的降解酶，通过对纯酶的n端测序或肽谱分析（maldi-tof/tof ms），获得肽段序列，然后设计简并引物扩增获得基因序列。

2018/03-2018/05 通过基因敲除和互补实验，基因异源表达实验，结合代谢途径，鉴定降解关键酶的功能。