1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
1 课题研究意义
丁香假单胞菌是一类盛行的植物病原细菌,所引起的植物病害发生率居十大细菌性植物病害之首;液泡是成熟植物细胞中体积最大的细胞器,在抵抗各种生物逆境和非生物逆境过程中发挥重要作用,而包含了vamp727蛋白的snare复合体在维持液泡形态过程中起重要作用。通过探究vamp727在植物抗病过程中的具体功能,有助于进一步明晰植物抵抗病原菌侵染的防御机制,为更好地防治植物病害打下基础。
2 国内外研究概况
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2. 研究的基本内容和问题
1 研究目标
为了了解vamp727在植物抗病中的功能,我们选择了拟南芥vamp727基因的纯合体atvamp727作为研究对象,探究在丁香假单胞杆菌番茄致病变种dc3000株(pst dc3000)侵染拟南芥的过程中vamp727的功能,以及侵染后vamp727在细胞内的组织表达情况。
2 研究内容
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3. 研究的方法与方案
1 研究方法
1.1 gus染色
按照tan等(2010)的配方配制gus染液,将植物材料放入gus染液中,于37 ℃下染色4 h,然后吸出gus染液,用脱色液(无水乙醇:冰醋酸=3:1)进行脱色,待材料脱色充分后进行观察照相。
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4. 研究创新点
首次研究拟南芥VAMP727在抵抗丁香假单胞菌番茄致病变种中的功能,进一步认识植物的抗病机理及VAMP727基因的生理功能。
5. 研究计划与进展
2018年1月-3月
收集拟南芥vamp727纯合体的种子;处理种子并铺苗,待幼苗长至一定长度后移栽入蛭石中继续培养;划线培养丁香假单胞菌番茄致病变种dc3000株,待菌落长出后封好培养皿,放入4℃冰箱中待用。
2018年3月-4月
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