1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
1. 本课题的意义、国内外研究概况、应用前景等(列出主要参考文献)(一)本课题的意义裂荚是荚果发育到种子成熟期后,在一定时间和一定环境条件下,果荚沿着荚皮的背、腹缝线处裂开,然后散播出种子,使成熟种子能够落地的一种自然现象[ ]。
虽然对植物自身而言,裂荚是植物长期进化过程中形成的重要繁殖特性,对种子传播、繁殖和保持物种多样性都具有重要意义。
但在农业生产中,豆科植物裂荚将会导致种子在收获前大量脱落,给种子生产造成严重的损失[ ]。
2. 研究的基本内容和问题
2. 研究的目标、内容和拟解决的关键问题1.选题研究目标、研究内容和拟解决的关键问题 (1)研究目标本研究的主要目标是:1.研究gmrnf1a基因在大豆裂荚中的功能;2.分析得出gmrnf1a基因的表达模式。
3.提交1份高质量的毕业论文。
(2)研究内容 本研究的主要内容是:1. 阅读相关文献;2. 进行实验操作,包括基因的克隆、大豆组织表达分析、拟南芥原生质体亚细胞定位以及拟南芥遗传转化等;3. 分析得到的数据;4. 撰写论文。
3. 研究的方法与方案
3. 研究方法、技术路线、实验方案及可行性分析 1. 研究方法提取的花的rna,反转录后得到cdna第一条链,在cdna中克隆得到目的片段。
回收、连接、转化后测序得到该基因的序列信息。
根据该序列设计荧光定量pcr引物,进行荧光定量分析。
4. 研究创新点
4. 特色或创新之处本部分研究属于本实验室课题的一部分,全课题为《crispr/cas9介导的大豆gmagl1定点突变及gmrnf1a/gmrnf2a功能的初步研究》,其通过实验可以证明gmagl1的突变会导致大豆荚发育迟缓,并通过筛选cdna文库发现e3泛素连接酶gmrnf1a。
作为子课题,本部分将研究重点放在gmrnf1a基因上,gmrnf1a基因并没有过相关的深入研究。
本研究将克隆并初步功能研究能够与gmagl1 相互作用的gmrnf1a,并在拟南芥中过表达gmrnf1a,为解析gmagl1调控花及果实发育的机理提供重要信息。
5. 研究计划与进展
5. 研究计划及预期进展论文计划在10个月的时间内完成。
(1)栽培实验材料时间:2017年6月(2)提取、纯化植物总RNA及cDNA第一链的合成时间:2017年7月(3)基因cDNA全长的克隆时间:2017年7月至2017年8月(4)基因序列及氨基酸序列分析时间:2017年9月(5)基因表达分析时间:2017年10月(6)亚细胞定位时间:2017年11月 (7)基因转化拟南芥时间:2017年8月至10月(8)论文的撰写时间:2017年12月至2018年5月
