1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
水稻是世界三大粮食作物之一，是我国的重要主粮，其播种面积占全国1/3，产量占1/2。
选择优良性状的水稻一直以来是育种科研人员不懈努力的目标。
而良种选择的基础是有性状变异的突变体。
2. 研究的基本内容和问题
1.1项目研究目标：（1）探索crispr/cas9系统对水稻的编辑效率，为编辑其他禾本科植物基因组的可行性提供参考；（2）通过crispr/cas9基因编辑技术创制新的突变体，丰富水稻育种材料库；（3）其中谷蛋白前体增加突变体材料为研究谷蛋白转运、沉积途径中的关键基因奠定基础；（4）结合市场需求，挑选出与生产目标相符的水稻育种材料，加快水稻新品种的选育。
1.2项目内容：（1）构建水稻crispr/cas9突变体（实验室已完成）实验室根据调控水稻sec23c、sec24、badh2、ssiia和ssivb的外显子序列（通过在genbank上查询），设计它们的grna。
按a/g(n)20ngg序列设计20nt的寡核苷酸grna序列，在水稻基因组数据库中比对设计好的grna序列以排除非特异性的靶切位点；构建载体；克隆转化了载体的农杆菌转化到水稻愈伤组织；组织培养；移栽。
3. 研究的方法与方案
2.1研究方法2.1．1异常粉质垩白观察：突变体材料去壳得到糙米，在体视镜下观察，挑选突变体材料中表现为粉质不透明的种子，进行统计分析。
2.1.2突变体谷蛋白前体的sds-page分析 除宁梗4号选取两粒种子外，其余材料每份随机挑选8粒种子。
每粒种子去壳后分别用钳子夹碎放入1.5ml的离心管中，加入65℃温浴的蛋白提取液300μl (4(w/v)sds，4m urea，5(v/v)2me，0.125 m tris-hci，ph6.8)，提取过夜后离心，取8μl上清液点样sds-page（sodium dodecyl sulfate polyacrylae gel electrophesis，十二烷基硫酸钠聚丙烯酰氨凝胶电泳）。
4. 研究创新点
特色或创新之处(1)本项目在已有的水稻crispr/cas9突变体创建研究基础上，尝试验证其他靶位点进行基因编辑的效率，从而完善对crispr/cas9技术编辑水稻基因组效率的认识，对已有的研究进行补充。
(2)关注突变体材料的谷蛋白前体变化，研究突变体材料的谷蛋白含量，结合实验室对低谷蛋白水稻研究结果，进一步弄清水稻谷蛋白的表达调控及谷蛋白的合成、转运和沉积等过程的机理。
(3)本项目以水稻作为实验材料，基因组只有430mb，并已完成全测序。
5. 研究计划与进展
研究计划时间计划 预期研究进展2017年7-8月 （1）阅读相关文献，对项目涉及的理论知识进一步学习（2）熟悉项目中各种基本的实验原理，操作过程以及注意事项（3）与导师进一步沟通，确定正确的实施方案2017年9-10月 （1）筛选突变体（2）撰写文献综述2017年11-12月 （1）种子胚乳异常粉质垩白的观察（2）突变体直链淀粉含量的测定2018年3月 （3）突变体谷蛋白前体的检测（4）整理实验结果2018年4月 （1）对实验结果进行分析总结（2）根据实验结果，撰写毕业论文（3）与导师沟通修改论文预期研究成果（1）验证crispr/cas9技术对水稻基因组的编辑效率。
（2）获得新的突变体，丰富水稻育种库。
（3）为研究水稻谷蛋白的表达调控及谷蛋白的合成、转运和沉积机理提供基础。
