1. 研究目的与意义
阻燃剂是一种降低火灾风险的材料助剂,广泛应用于各行业各类产品中,包括建材、纺织、塑料、电子、造纸和家装等,成为仅次于増塑剂的一类材料添加助剂。随着阻燃剂使用量的逐年增加,其残留在各类环境介质和生物体内被广泛检出,所诱发的生态风险和健康危害近年来受到普遍关注。因为多溴联苯醚类阻燃剂在多国被禁用，作为溴代阻燃剂的替代产品, 有机磷酸酯类阻燃剂由于其低腐蚀、易代谢、多功能和抑烟效果好等特点被人们广泛接受,其使用量和在环境中的检出量都逐年升高。常见的有机磷燃剂有近二十种,其中磷酸三氯丙脂（（Tripropylphosphate）TCPP）为使用量较大的品种。Laura等发现TCPP、TECP、TDCPP都可能影响生物的神经系统发育，并且提出它们的毒性作用可能由多种机制组成。此外，TCPP的物理化学性质都非常稳定并有较强的吸附性，特别是水环境中的TPCC普通的降解过程几乎无法去除。为了防止TPCC大量生产和使用后造成环境污染，对生态系统造成健康风险胁迫，研究其在环境介质中的生态毒性变得刻不容缓。斑马鱼个体小、产卵周期短、产卵量高、胚胎通体透明、体外受精、体外发育等特点被广泛应用于胚胎学、发育生物学和环境毒理学、分子生物学等领域的研究，此外，研究表明鱼类的生理系统与哺乳动物类似，许多污染物导致的鱼类生理功能紊乱都与人类相似，特别是在内分泌系统功能等方面与人类高度同源，因此斑马鱼作为脊椎模式生物被广泛应用与分子毒理学研究。
2. 研究内容和预期目标
1、计算磷酸三氯丙酯急性暴露斑马鱼幼鱼的lc50\ec50 和半孵化浓度，并模拟剂量效应曲线；
2、调查磷酸三氯丙酯对斑马鱼致畸的形态特征。统计畸形种类；
3、测定磷酸三氯丙酯急性暴露幼鱼对其运动活力、运动速度等的影响--行为学影响；
3. 研究的方法与步骤
本课题主要研究有机磷阻燃剂磷酸三氯丙酯对斑马鱼神经毒性的作用
1、通过使用tpcc水解溶液对斑马鱼胚胎进行毒性试验，使用收集试验当天斑马鱼产出的胚胎，通过体式显微镜挑选出形状饱满，颜色透明的健康胚胎。以 24孔细胞培养板作为染毒容器，使用15，30，45，50，60mg·l-1暴露浓度的tpcc水解溶液，并使用体式显微镜观察胚胎的死亡、发育和孵化情况并拍照记录。
2、通过使用tpcc水解溶液对斑马鱼幼鱼进行毒性试验，使用9.2、10.6、12.2、14.0、16.2 mg·l-1暴露浓度的tpcc水解溶液，整个试验过程中每天对水中的温度和溶解氧进行监控，整个试验期间每隔 12 h 曝氧 1 h，以维持水中溶氧度。试验期间，分别在 6 h、12 h、24 h、48 h 和 96 h 观察受试鱼的中毒症状和死亡情况，死亡标准为用镊子轻戳受试鱼体无应激反应，并观察受试鱼腮部无呼吸活动，即判定为死亡。并观察幼鱼死亡情况计算磷酸三氯丙酯急性暴露斑马鱼幼鱼的lc50\ec50 和半孵化浓度，并做图。
4. 参考文献
1、，孔志明. 环境毒理学
2 liu jf, xiang cy, huang wh, mei jy, sun lm, ling yh, wang ch, wang xd, dahlgrenc r.a, wang hl. neurotoxicological effects induced by up-regulation of mir-137
following triclosan exposure to zebrafish (danio rerio).aquatic toxicology 2019, 206:176-185.
5. 计划与进度安排
2022/03/01-2022/03/31 计算磷酸三氯丙酯急性暴露斑马鱼幼鱼的lc50\ec50 和半孵化浓度，并做图。同时，调查磷酸三氯丙酯对斑马鱼致畸的形态特征。并拍照组图；
2022/04/01-2022/04/30 测定磷酸三氯丙酯急性暴露幼鱼对其运动活力、运动速度等的影响--行为学影响；
2022/05/01-2022/05/31 测定磷酸三氯丙酯对乙酰胆碱酯酶（ache）活性的影响，并撰写论文
