重组苍白杆菌核糖磷酸异构酶B催化制备稀少糖研究开题报告

 2022-02-16 20:36:03

1. 研究目的与意义

稀有糖是常见糖(如葡萄糖、半乳糖等)分子中至少有一个羟基被氢原子或其他基团取代所形成的化合物。尽管在自然界中含量极少,但这些物质却在膳食、保健、医药等领域中发挥着非常重要的功能。如有些稀有糖有天然糖的甜度,但是机体不能代谢或者代谢很少,因而它可作为蔗糖等高热量糖的替代物,特别适用于肥胖者。此外,稀有糖常用作添加剂改善食品的理化性质,发挥多 种生理功能作用,还可用于修饰药物或活性物质从而优化其功能性。

人们通常利用化学合成和生物转化方法进行稀有糖的大量生产。相对于化学合成法存在副产物多、污染严重等缺点,生物转化法因具有反应条件温和、对环境友好、高度的立体选择性等优点而倍受广大糖类研究者的青睐。

近年来,许多研究已经提出使用酶促过程产生稀有糖,因为酶促过程具有更高的效率和立体选择性,并且可以在比化学过程更温和的条件下反应。日本香川大学稀有糖研究中心kenizumori教授根据近20年的稀有糖生物转化研究,提出了一套完整的适用于所有稀有糖的生物制备策略izumoring方法,即利用d-塔格糖3-差向异构酶、醛糖异构酶和多元醇脱氢酶等进行所有单糖及糖醇之间的相互转化和制备各种稀有糖。

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2. 研究内容和预期目标

(1)稀有糖生产方面的潜力初步研究

底物特异性探究,通过半胱氨酸咔唑法对该酶的底物谱进行探究。

(2)l-鼠李糖转化条件优化研究

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3. 研究的方法与步骤

1.半胱氨酸咔唑法

试剂:70%浓硫酸,1.5%半胱氨酸,0.12%咔唑酒精。

步骤:将反应液稀释5倍后,依次加入3ml70%浓硫酸,100μl 1.5%半胱氨酸,100μl 0.12%咔唑酒精,60℃水浴10min,用分光光度计在535nm处测吸光度值。

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4. 参考文献

[1] 李路, 张贵生. 稀有糖的合成方法研究[j]. 有机化学, 2008, 28(7):1129-1137.

[2] 沐万孟, 张涛, 江波,等. 稀有糖的生物转化生产策略:izumoring方法[j]. 中国生物工程杂志, 2007, 27(7):129-136.

[3] 易阳, 张名位. 稀有糖的研究进展[j]. 食品科学,2010, 31(11):303-307.

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5. 计划与进度安排

具体实验进度安排如下:

(1)2022-2022-1学期17-20周~2022-2022-2学期第1周~第4周(2022-12-25~2022-03-23)

接受任务,搜集的资料、调查的数据并进行整理分析,总结归纳核糖-5-磷酸异构酶转化中的问题。借助网络资源、查阅相关书籍资料设计实验操作方法。翻译英文文献《novel substrates of a ribose-5-phosphate isomerase from clostridiumthermocellum》。

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