联苯代谢基因簇的水平转移研究开题报告

1. 研究目的与意义

研究背景：

多环芳烃指的是分子中带有两个或以上苯环的碳氢化合物，在煤、石油、有机高分子化合物等有机物进行不完全燃烧时产生的挥发性碳氢化合物，广泛存在于水体、大气、土壤、生物体中。这些化合物在环境中的半衰期非常长，并且它们具有致畸、致癌、致突变毒性及环境激素毒性，如何解决它们的存在或减少它们的存在已经成了一个重大问题。这些化合物最终会通过微生物的降解作用被矿化。自然界中微生物品种多样，具有很强的分解代谢能力和较高的代谢速率，被认为是环境中去除多环芳烃的最重要途径。许多细菌、真菌、藻类都有降解多环芳烃的能力，但其降解机制不同，且降解作用与效果在不同的环境，不同的生长发育阶段有所差别。微生物代谢多环芳烃的方式有两种：（1）以多环芳烃为惟一碳源和能源；（2）多环芳烃与其他有机质进行共代谢。目前已经发现了许多可以降解多环芳烃的微生物。其中降解基因簇也已经被解析。大多数都存在于质粒上，少数在染色体上的也比较容易丢失。恶臭假单胞菌 b6-2 是一株能够以联苯为唯一碳源生长的菌株, 该菌株具备多种杂环污染物降解能力。

研究目的：

研究联苯降解菌株b6-2中位于染色体上的联苯降解基因簇的水平转移情况。

2. 研究内容和预期目标

研究内容：

联苯降解菌株b6-2中位于染色体上的联苯降解基因簇的水平转移情况。

预期目标：

3. 研究的方法与步骤

研究方法：

涂布平板计数菌落数，扩增联苯降解基因簇验证。

步骤包括：

1.在柠檬酸培养基中传代细胞

4. 参考文献

[1] 于秀艳, 丁永生. 多环芳烃的环境分布及其生物修复研究进展[j]. 大连海事大学学报, 2004, 30(4):55-59.

[2] 杨发中, 颜阳, 张泽志,等. 多环芳烃研究进展[j].云南化工, 2005,32(2):44-48.

[3] 于萍萍, 张进忠, 林存刚. 多环芳烃在环境中污染的微生物降解的研究进展[j]. 资源环境与发展, 2006,(3):35-39.

5. 计划与进度安排

1. 2.20—3.28 查阅相关文献资料完成开题报告

2. 3.13—4.9 设计实验方案，做好实验前准备，包括设计引物，购买相关的分子试剂盒，制备大肠杆菌感受态等。

3. 4.10—5.14 进行实验，包括pcr，酶切，连接，转化，挑阳性克隆，送测序，转化表达宿主，诱导，进行表达检测等。