生物素化甲基化结合蛋白的制备及其应用文献综述

一、选题背景及意义1.DNA甲基化的研究意义DNA甲基化是表观遗传学的重要研究内容。

它是指通过DNA甲基化转移酶（Dnmt）的作用，在胞嘧啶5位碳原子上引入一个甲基基团，从而使之变成5-甲基胞嘧啶(5-mC)的过程。

同时，也是基因在转录水平调控的主要方式之一[1]。

机体通过DNA的甲基化修饰，调节转录因子结合、组蛋白去乙酰化等过程，最终调控靶标基因的表达水平。

DNA甲基化在机体的生长、发育以及疾病的发生、发展等生理、病理过程中发挥着广泛的作用，几乎所有的人类肿瘤中都存在肿瘤相关基因的异常甲基化,是肿瘤早期检测的重要分子指标[2]。

2.常见的DNA甲基化的检测方法 2.1 亚硫酸氢盐化学修饰法 DNA经亚硫酸盐处理后，未甲基化的胞嘧啶（C）被转化成尿嘧啶（U），甲基化的胞嘧啶保持不变。

处理后的DNA，通过测序或使用特异性引物PCR，可以得到非常准确的DNA序列甲基化位点信息[3]。

该方法存在的问题：进行化学修饰的耗时过长，胞嘧啶转化不完全，大量DNA降解等。

2.2 限制性内切酶法利用甲基化敏感的限制性内切酶对甲基化区域不切割的特性，将DNA消化为不同大小的片段后再进行分析。