固定化乙酰胆碱酯酶的酶学性质的探讨开题报告

1. 研究目的与意义

植物酯酶源丰富，取材方便，制备简单，可利用植物酶中乙酰胆碱酯酶的抑制技术测定果蔬中有机磷和氨基甲酸酯类农药。酯酶的固定化可提高酶的稳定性，本课题探讨固定化的乙酰胆碱酯酶的酶学性质，研究固定化酶的pH适用范围，热稳定性及再生情况。

2. 国内外研究现状分析

据报道,目前已对动物中的乙酰胆碱酯酶进行了分离纯化,且主要集中在动物肝脏、血液和脑组织中,如鸡血,牛血等;另外,蚯蚓中乙酰胆碱酯酶含量也较为丰富,也有报道海洋鱼类如鲅鱼脑组织中乙酰胆碱酯酶含量较为丰富。目前研究主要集中在从昆虫体内提取乙酰胆碱酯酶,而且国内外也进行了大量的研究,如家蝇、麦二叉蚜、烟草天蛾、光叶库蚊、黄猩猩果蝇、黄粉甲、美洲淤夜蛾、豆荚草盲蝽、马铃薯叶甲、骚扰角蝇和棉铃虫等。酶抑制法进行农药残留检测以从敏感家蝇中提取的乙酰胆碱酯酶效果最佳,其敏感性优于其他来源的乙酰胆碱酯酶,董杰等研究表明,家蝇羽化后2～3d其头部的乙酰胆碱酯酶敏感性最高。

3. 研究的基本内容与计划

研究内容：

(1)分别探究小麦中乙酰胆碱植物酯酶和固定化乙酰胆碱酯酶的酶学性质，通过改变酶液量、时间、温度、ph值、底物浓度、显色剂浓度等条件，测定不同吸光度，探究不同因素对酶活的影响。

(2)分别探究乙酰胆碱酯酶和固定化乙酰胆碱酯酶的ph稳定性、热稳定性和储存稳定性，并进行比较。

4. 研究创新点

以壳聚糖微球为载体的固定化乙酰胆碱酯酶与游离的乙酰胆碱酯酶之间酶学性质的比较，探究固定化酶的所具有的优势。