东方百合ISSR-PCR反应体系的优化与引物筛选开题报告

1. 研究目的与意义

ISSR(inter-smiplesequencerepeats)技术是由Zietkiewicz于1994年发明的一种微卫星类分子标记技术，建立在SSR基础之上，用于检测SSR间DNA序列差异。ISSR技术由于引物较长，退火温度较高,增强了实验的可重复性，同时实验操作简单、快速、高效、不需要繁锁的构建文库、设计引物、杂交、同位素显示等步骤，而且ISSR标记可以揭示整个基因组的一些特征，并呈孟德尔式遗传，因此该技术一问世就在植物遗传分析中得到了广泛应用。ISSR分子标记的不足之处在于要对PCR扩增的反应体系和反应程序进行摸索和优化：呈孟德尔式遗传．即显性遗传标记。不能区分显性纯合基因型和杂合基因型。本实验旨在对东方百合ISSR-PCR反应体系进行摸索和优化，并筛选出合适的引物。

2. 国内外研究现状分析

在ISSR技术应用的初期，主要涉及水稻、小麦等草本经济作物，近年来已逐步拓展到中草药、花卉及木本观赏植物等领域，并广泛应用于品种鉴定、亲缘关系分析、遗传多样性分析、遗传连锁图谱构建等方面。

3. 研究的基本内容与计划

内容：对东方百合issr-pcr反应体系进行摸索和优化，并筛选出合适的引物。

计划：1.2012年2月25日～3月7日，阅读文献，撰写开题报告；

2.2012年3月8日～4月28日，进行实验；

4. 研究创新点

1.从通用引物中筛选百合issr分子标记的特异引物

2.筛选到的特异引物进行百合杂种后代的大规模鉴定

3.辅助构建百合抗病图谱