1. 研究目的与意义
一:研究和目的和意义
自1987 年比利时的vacek等首次报道将bt毒蛋白基因转入烟草获得转bt基因的抗虫植株以来,国内外已有用不同的bt毒蛋白基因和转化方法获得转基因烟草、棉花、玉米、油菜、马铃薯、水稻等多种抗虫作物。然而转基因作物的飞速发展在带来巨大经济利益的同时,其安全性也越来越被人们重视,尤其是转基因水稻的出现,使人们对转基因食品的安全性更加关注。因此对转基因水稻进行安全性评价是十分必要的。
在进行转基因生物致敏性安全评价时,需要一定量的外源蛋白质而转基因植物中外源蛋白的表达水平极低。bt毒蛋白cry基因在转基因植物中的表达量一般占全部可溶性蛋白的0.001% 以下,因此从转基因植物中提取外源蛋白是不切实际的。cry1ab/c蛋白是一种源于苏云金杆菌(bacillus thuringiensis)的bt基因表达的毒蛋白。目前国际上在评价转bt基因植物表达的杀虫蛋白的生物安全性和环境行为时,往往采用该基因在微生物e. coil.内的表达产物。这样可以确保检测的准确性。转移的基因片段是否得到表达。
2. 国内外研究现状分析
二:国内外的研究进展
用于转基因抗虫水稻改良的外源基因主要有:编码苏云金芽孢杆菌毒蛋白的bt基因、蛋白酶抑制剂基因和某些植物凝集素基因等
bt毒蛋白基因是应用最为广泛和最有潜力的杀虫蛋白基因。目前,用于转基因抗虫水稻的bt毒蛋白基因有crylab,crylac。现已有许多转基因抗虫水稻研发成功
3. 研究的基本内容与计划
三:研究内容
1:完成转bt(cry1ab/c)基因的提前 pcr扩增并转入大肠杆菌
2:培养大肠杆菌,用含目的片段的菌株表达出转基因水稻(cry1ab/c)外源抗病蛋白质
4. 研究创新点
特色方面:本次课题研究着眼于对当前倍受关注的转基因食品安全性的评价做出。试验采用汕优63系德农正成种业采用自育的特异株型的强恢复系R63组配优良不育系珍汕97A,经多年的南繁北育选。具有很高的推广价值。结合了国内外的最新研究成果,针对汕优63在国内的实际种植进行试验利用Western blot 分析,Western blot检测对外源抗病蛋白的检测。确保准备性与可靠性
