表达鸡法氏囊病毒VP2蛋白重组枯草芽孢杆菌的构建及其免疫效力的研究开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

1 本课题研究意义

1．1 开发一种免疫法氏囊病的疫苗

鸡传染性法氏囊病是目前养鸡业中的主要传染病之一,由法氏囊病毒（ibdv）引起，本病限于210周龄的雏鸡发病,多发于46周龄,2周龄以下和成鸡均不感染发病,因为前者法氏囊尚未发育,后者法氏囊已经退化的缘故。临床峰期为一周,死亡率一般约15％左右,可达2030％。由于雏鸡腔上囊的病变,使免疫系统受损害,易并发其它疾病,给养鸡业带来较大损失^[1]。因此，寻找一种有效的疫苗，来降低雏鸡患上法氏囊病的几率，具有很大的现实意义。

2. 研究的基本内容和问题

2 研究目标：

构建重组枯草芽孢杆菌表达法氏囊病毒的抗原片段vp2蛋白；口服免疫雏鸡后评价其攻毒保护的效果，为开发新型口服免疫疫苗提供思路。

3 研究内容：

3. 研究的方法与方案

5 研究方法（实验方案）：

5.1 pcr扩增目的基因片段

5.2 连接t质粒、转化进大肠杆菌及验证

4. 研究创新点

7 特色、创新：

本实验课题不同于制作传统革兰氏阴性菌作为受体细胞的免疫制剂，而是选择了一种具有转化难度的革兰氏阳性菌枯草芽孢杆菌作为受体细胞来构成口服疫苗，来有效提高雏鸡对法氏囊病毒的免疫效力。由于枯草芽孢杆菌芽孢的外膜有多种蛋白，利用芽孢外膜蛋白的启动子可以在芽孢表面以融合表达的方式展示外源蛋白，枯草芽孢杆菌表面展示系统可根据不同需要展示蛋白，所展示蛋白且不易被肠道消化酶降解，易于被小肠吸收。所以应用枯草芽孢杆菌表面展示系统进行口服饲喂具有诸多优点。

5. 研究计划与进展

8 研究计划：

2016.092016.11 预实验的开展和实验方案的探索；

2016.122017.01 传染性法氏囊病毒vp2基因克隆以及重组枯草芽孢杆菌表达载体的构建；