1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
灵芝(ganoderma lucidum)是一种珍贵的中药材,在我国普遍分布,已有上千年的药用历史,早在中药学著作《神农本草经》中已有记载。
根据邵力平等人的著作《真菌分类学》[1]可知其分类位置是真菌门(eumycota),担子菌亚门(basidiomycotina)、层菌纲(hymenomycetes)、非褶菌目(aphyllophorales)、灵芝菌科(ganodermatoideae),灵芝属(ganoderma)。
众所周知,灵芝具有保肝护肝,促进睡眠,舒筋活血,促进代谢,抗衰老,提高免疫力,降血糖血脂,辅助肿瘤放化疗等功效,有着极高的药用和食用价值,一直以来灵芝都是中外学者研究的热点。
2. 研究的基本内容和问题
1 研究目标以灵芝菌丝生长速度、菌丝分叉情况及胞内ca2 信号水平为参照探究灵芝bhlh型转录因子gl30684对灵芝菌丝生长的影响。
2研究内容1.1 探究灵芝bhlh型转录因子gl30684沉默菌株在生长速度和菌丝分叉上的变化;1.2 探究灵芝bhlh型转录因子gl30684沉默菌株胞内ca2 水平的变化;1.3 通过meja处理,进一步探究灵芝bhlh型转录因子gl30684对灵芝生长速度、菌丝分叉及胞内ca2 水平的影响。
3拟解决的关键问题灵芝bhlh型转录因子gl30684沉默菌株中ca2 信号水平与灵芝菌丝生长及分叉的关系。
3. 研究的方法与方案
1 研究方法利用灵芝bhlh型转录因子gl30684沉默菌株及相应的野生型菌株为研究对象,采用pda固体培养基在平板上进行菌丝培养。
1.1 用在相同时间内测量菌株直径的方法比较转化子和野生型菌丝的生长速度。
1.2 用荧光增白剂染菌丝后在激光共聚焦显微镜下观察菌丝分叉情况。
4. 研究创新点
灵芝具有极高的药用价值,现已有不少相关研究,bHLH类转录因子是真核生物转录因子中的一个大家族,但其在灵芝中的研究却十分稀少,本实验研究某一个bHLH转录因子对灵芝生长的影响,为后续研究灵芝中bHLH类转录因子提供部分理论基础,且本实验中各种测定方法简便易行,周期短,易重复,可通过大量重复来提高实验结果的准确性。
5. 研究计划与进展
1 研究计划本人计划在2017年3月中上旬完成gl30684沉默菌株的系列生长实验,再开展1-2个新的转化子沉默菌株的系列生长实验。
2 预期进展2016年10月进实验室开始一些基本的实验操作,向师兄师姐学习了整个实验过程中需要用到的工具、仪器及测定方法等,11月份正式开始自己的实验,但因刚开始有些问题没有注意到,出现了较多失误,导致目前为止仅有测定的生长速度的实验结果。
2017年2月份中下旬开始后续实验,若期间没有较大失误,预计3月初可以完成gl30684沉默菌株的相关生长实验。
