1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
1 本课题意义 螺原体是一类非常特殊的微生物，最早发现于上世纪七十年代[1]。
螺原体和宿主之间的关系可分为共生(mutualism)、互生(commensalism)和致病(pathogenicity) 3 种，多数螺原体与宿主的关系为共生或互生[2]。
其宿主主要为植物[3]、昆虫和水生甲壳动物[4]，也有部分螺原体分离自哺乳动物[5]。
2. 研究的基本内容和问题
1 研究的目标通过蛋白竞争实验和抗体抑制试验来说明黏附蛋白在螺原体侵染宿主细胞过程中所起的作用。
2 研究内容2.1 螺原体黏附蛋白的原核表达在s. melliferum ch-1 的全基因组序列（草图）中搜索出黏附性膜蛋白的基因，将tga 的a 碱基突变成g 碱基（在大部分柔膜菌纲中的细菌体内tga 编码trp，而在大肠杆菌中表达时tga 为终止密码子。
因此，螺原体黏附性蛋白要在大肠杆菌原核表达系统中表达需要将tga 的a 碱基突变成g 碱基）。
3. 研究的方法与方案
1 研究方法及步骤1.1 研究材料实验室已有菌株s. melliferum ch-1意大利蜜蜂apis mellifera1.2 实验步骤1.2.1 螺原体黏附蛋白的原核表达与纯化（1）用ctab/nacl 法提取螺原体ch-1 的基因组，根据基因序列，用primer5设计带有酶切位点和保护碱基的引物，overlap extension pcr (oe-pcr) 做点突变扩增出黏附蛋白基因。
（2）构建pet28a黏附蛋白重组子，通过热激法转化到大肠杆菌dh5α感受态细胞中。
提取阳性菌落菌液pcr验证后，送样测序验证。
4. 研究创新点
通过蛋白竞争实验和抗体抑制试验，本项目建立起了螺原体的体外侵染模型，为研究其致病机理提供了依据。
5. 研究计划与进展
1 研究计划2016 年11月查阅资料与文献了解螺原体；基本实验操作的学习；利用实验室已有菌株进行基础实验。
2016 年12月螺原体ch-1 黏附蛋白的原核表达与纯化。
2017 年1 月 意蜂中肠细胞的分离与培养；螺原体菌落形态计数法试验方法的探索。
