1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
糖化酶又称葡萄糖淀粉酶（glucoamyalse，（ec.3.2.1.3.）），是淀粉分解酶的一个分支。它能把淀粉从非还原性末端水解α-1,4葡萄糖糖苷键产生葡萄糖，也能水解α-1,6葡萄糖糖苷键转化成葡萄糖。糖化酶可以用于涉及到淀粉加工处理的各种领域。还可以用于以葡萄糖作为发酵培养基的各种抗生素、有机酸、氨基酸、维生素的发酵。同时还可以用于酒精、淀粉糖、味精、啤酒等工业。目前应用的糖化酶的产生菌主要是曲霉（aspergilus niger），同时雪白艮霉，德氏根霉以及黑曲霉等也是糖化酶的重要产生菌，同时来源枯草以及放线菌的一些糖化酶也有报道，但是目前来源于粘细菌的糖化酶尚未报道。
实验室前期从粘细菌中克隆获得一个新型的糖化酶glucam，本研究以构建完成的表达菌株e.coli bl21(de3) (pet29a-glucam)为材料，通过iptg对其进行诱导表达，同时对该表达的重组酶进行了酶学性质研究，这对于开发一些新的并具有特殊水解特性的水解酶的应用具有实际意义。
参考文献
2. 研究的基本内容和问题
本研究主要在于实现该糖化酶的诱导表达及纯化，并对该酶的酶学性质进行详细的研究，为后期大规模的工业发酵提供前期的基础数据。
本研究研究内容分为以下几个方面：
1、重组糖化酶的表达及纯化；
3. 研究的方法与方案
本研究材料为本实验室构建完成的表达菌株e.coli bl21（de3）（pet29a-glucam），通过iptg诱导培养并结合ni柱纯化得到其重组酶，并研究该重组酶的酶学性质；最适ph和酸碱稳定性的测定；最适温度和热稳定性的测定；金属离子和有机溶剂对酶活的影响及底物特异性的测定。
技术路线见附件。
该实验方案用到的表达菌株e.coli bl21（de3）（pet29a-glucam）是基于蛋白表达的基因原则设计的，是目前对于外源基因的异源表达最常用的技术路线，具有很好的可行性。
4. 研究创新点
1、成功实现了糖化酶GlucaM的异源表达和纯化；
2、GlucaM的酶学特性表明该酶具有较好的工业应用前景。
5. 研究计划与进展
（1）2014.9-2014.11：文献查询与重组糖化酶的表达纯化。
（2）2014.12-2015.3：糖化酶的酶学性质测定。
