金针菇遗传转化体系的构建开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

1、研究的意义：

金针菇[ flammulina velutipes(curt.:fr.)sing.]又名冬菇、朴菇、构菌、青杠菌、毛柄金钱菌, 隶属担子菌亚门(basidiomycotina),层菌纲( hymenomycetes),伞菌目(agaricales),口蘑科(tricholomataceae),金钱菌属( flammulina)。金针菇菌盖滑嫩、菌柄细长脆嫩, 形美, 味鲜, 是世界上著名的食药两用菌和观赏菌,具有较高的营养价值和药用价值, 有广阔的开发前景。

金针菇富含蛋白质、碳水化合物、维生素和矿质元素,脂肪含量较低, 是一种不可多得的高营养食品^[1]。研究者在传统果脯生产的基础上加以改进和提高, 以葡萄糖代替了部分蔗糖,研制了低糖金针菇脯^[2]。此外，以金针菇为原料, 用嗜酸乳酸菌发酵制成乳酸发酵金针菇饮料^[3]。用金针菇子实体加工制成的保健食品如金针露、金针馅饼等食品，在国际市场上十分畅销。将金针菇子实体提取液添加到原奶中，经乳酸发酵后，可制得具有较高营养和保健价值的金针菇酸奶^[4]。

2. 研究的基本内容和问题

1、研究目标

通过电转金针菇菌丝片段与农杆菌介导的金针菇原生质体转化两种方法构建遗传转化体系。

2、内容：

3. 研究的方法与方案

1、研究方法

1) 潮霉素抗性筛选：金针菇接种于不同浓度梯度的潮霉素抗性平板上，观察生长情况。

2) 金针菇原生质体再生率：不同酶解时间，温度等条件下，观察金针菇原生质体的再生率。

4. 研究创新点

通过电击转化法与农杆菌转化法两种方法建立金针菇遗传转化体系。

采用含有绿色荧光蛋白报告基因的质粒来验证转化结果。

5. 研究计划与进展

1、 研究计划

1) 2013.12-2014.2查阅资料，整理实验思路，学习基本方法

2) 2014.2-2014.3潮霉素抗性筛选与金针菇原生质体再生率优化