水稻原生质体中CaM过表达增强抗氧化酶活性开题报告

 2022-02-07 17:09:50

1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)

众所周知,aba作为一种能引起芽休眠、叶子脱落和抑制细胞生长等生理作用的植物激素,能够调节多种植物生长发育过程。人们主要把他认定为植物的"抗逆诱导因子"。一般来说,干旱、寒冷、高温、盐渍和水涝等逆境都能使植物体内aba迅速增加,同时抗逆性增强。通过对相关蛋白质基因表达的调节,以及合成酶的活性影响,从而改变植物的生理性状,调节植物对各种胁迫的反应。在干旱、盐渍等条件下,植物细胞积累aba,刺激气孔关闭,调节基因表达,诱导渗透调节物质的积累以及激活抗氧化防护系统,从而增强植物抵抗环境胁迫的能力。ca2 是植物细胞信号转导中最基本最重要的第二信使,植物产生aba后传递抗胁迫信号作用于各个细胞就需要ca2 的帮忙,而ca2 通过对钙调蛋白的作用来传递信息。由此可见,这一系列的联系表明钙调素基因必然与抗氧化防护酶有着某种联系,而本实验就是为了论证该联系是否存在。

参考文献:

1.hayashit,banbam,shimoday,kouchih,hayashim,imaizumi-anrakuh.adominantfunctionofccamkinintracellularaccommodationofbacterialandfungalendosymbionts.plantj,2010,63:141-154

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2. 研究的基本内容和问题

研究目标:以水稻为材料,调查在aba诱导下钙调素基因调控的钙调蛋白,钙离子浓度对抗胁迫的作用,用抗氧化防护酶的活性变化来测定观测

研究内容:aba诱导下钙调素基因对抗氧化防护酶的作用

拟解决的问题:需要对植物进行钙调素基因的扩增和失活,使基因的表达上升和下降。所以说,要将扩出来的钙调素基因转入到植物体中使表达量上升,或将植物体内钙调素基因表达量大大降低。得到你想要的水稻材料是一件需要不断尝试,可能要经历多次失败的事情。

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3. 研究的方法与方案

研究方法:本实验拟以水稻栽培种日本晴(野生型)作为实验材料,水稻基因组中有钙调素基因编码钙调蛋白,实验室已知在aba诱导下上调表达的钙调素基因,在水稻原生质体中瞬时表达与瞬时沉默目标钙调素基因,从而检测aba处理下原生质体中抗氧化防护酶活性,了解钙调素基因表达与抗氧化防护酶活性之间的关系。

图若不可见,见附件

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4. 研究创新点

钙调蛋白是植物细胞特有的一种蛋白激酶,已被证实能够传感Ca2 信号。然而,其仍有许多待发现之处需要我们探索。本实验准备探究ABA介导下钙调蛋白是如何参与植物生理生化反映。为扩宽钙调蛋白的功能和作用打下基础。

5. 研究计划与进展

研究计划:

1.使用师兄提供的钙调素基因两端引物,得到钙调素基因片段(1周),并开始种植水稻植株

2.制备钙调素基因的rnai(1周)

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