1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
crispr来自微生物的免疫系统，这种工程编辑系统利用一种酶，对生物的dna序列进行修剪、切断、替换或添加。
crispr-cas9系统是2013年报道的最新的基因剪辑技术[7-9]，可作用于多种细胞。
主要是利用靶点特异性的rna引导cas9核酸酶到达基因组的具体靶点，对特定基因位点进行切割导致突变。
2. 研究的基本内容和问题
研究目标：该课题主要研究ago2在癌细胞中的作用，旨在回答由于ago2基因突变导致其表达、功能上的缺失对人的癌细胞的生长和转移有何影响？试图揭示ago2在人类细胞中的作用、机理，为未来研究、检测、抑制肿瘤发生和转移提供理论基础与新的思路和手段。
研究内容：ago2在人体细胞内广泛表达并且具有普遍的功能机理，该课题主要研究ago2水平下调对细胞的影响。
我们将使用crispr-cas9技术构建ago2功能性缺失的人的癌症细胞的模型，进而研究ago2在癌细胞中的功能。
3. 研究的方法与方案
研究方法：该课题主要涉及的研究方法有体外细胞培养法、分子克隆、细胞转染和稳定株筛选、dna、蛋白质、rna提纯和分析等。
技术路线：1.构建crispr-cas9载体：设计针对ago2的sgrna，构建质粒表达载体。
2.培养细胞：在体外培养稳定生长的细胞系，如hela、h1299细胞系等。
4. 研究创新点
本课题原创性强，研究思路和步骤简炼, 但意义重大。
采用最新最好的基因剪辑技术,在人的癌细胞内高效地突变ago2基因，构建基因突变的细胞模型，这样可以节约大量的时间、人力、物力、财力。
通过对细胞中dna和蛋白质的鉴定，又将快速有效地鉴定ago2在癌细胞中的功能。
5. 研究计划与进展
1. 2016.03-2016.04构建crispr-cas9载体，同时培养稳定生长的细胞系。
2. 2016.04-2016.05筛选ago2功能性缺失的癌症细胞系。
3. 2016.05-2016.06鉴定ago2基因的表达，并完成毕业论文。
