盐霉素载药控释体系的制备研究开题报告

1. 研究目的与意义

目前，我国大约有３亿人患有肿瘤疾病，有效治疗肿瘤疾病已成为目前不容缓的的现状。1974年有研究者发现盐霉素(SAL)是一种具有生物活性的抗生素，随之成为一代离子型促生长剂和离子型载体抗生素的代表。后续研究发现，SAL能够有效和细胞中的阳离子，并且帮助这些离子穿透细胞膜，发挥杀菌作用。后来有研者意外发现，SAL不仅可以用于家禽防球虫，还可抑制多种肿瘤干细胞的生长及转移，同时可增加肿瘤细胞对药物治疗的敏感性，诱导肿瘤细胞凋亡，降低细胞耐药特性，选择性地杀伤肿瘤细胞。。因此，鉴于SAL抗癌作用效果，本课题选取SAL作为杀伤肝癌干细胞的药物，以期达到有效治疗肿瘤的目的。

虽然SAL可以有效杀伤肝癌干细胞，但是其水溶性差，生物利用度低，具有较强的神经和肌肉毒性，而且对肝癌细胞杀伤作用较弱，据文献报道，游离SAL对HepG2细胞杀伤48h时IC50值为19．91uM，所以，如果将游离SAL对HepG2细胞直接用药，抗癌效果不佳，且对机体毒副作用较大。因此，我们需要考虑克服SAL的以上缺点，以期取得更好的抗肝癌效果。

1965 年，由英国科学家 Alec Bangham 在研究磷脂悬浮于水时，首次展示了脂质体是球形的、自我封闭的、分散在水中并且包封一部分水性递质的脂质粒子，之后各种各样的脂质体制备技术和表征方法不断诞生，促使一个新的研究领域快速发展。脂质体作为药物的使用可以追溯到脂质体被正式发现以前，早在 1934 年 IG Farbenidustrie 的英国专利已经描述了使用磷脂和胆固醇的水分散体作为药物载体，作为药物传递方面的运用。在脂质体正式提出后 Bangha 和 Gregoriadis 等科学家就在脂质体作为药物传递系统的应用做了很多研究，1971 年 Grego[1]riadis 等首次将脂质体用于生物活性物质的转运，经过 40 多年的发展，脂质体在很多领域得到了应用，可以作药物控释的载体、疫苗佐剂、用于心血管疾病的诊断与治疗、治疗的加载系统等。脂质体作为靶向给药系统的载体具有简单、无毒、无免疫原性等突出的优点。因此我们决定采取制备载盐霉素脂质体，已达到解决盐霉素存在的毒副作用，从而应用于临床医学解决目前困扰大部分人的肿瘤等疾病。

2. 研究内容和预期目标

盐霉素（salinomycin)又叫做沙利霉素是由白色链霉菌深沉发酵产生的一种环醚类的离子载体抗生素，易溶于甲醇、三氯甲烷、丙酮等有机溶剂，不溶于水。盐霉素作为新型的鸡用防球虫剂及仔猪、育肥猪的生长促进剂，因为其抗菌效果好，低毒性，生产工艺相对简单，且原料容易获取，价格低，是市场上最具前景的兽用药物之一。gupta等在2009年第一次证实了盐霉素能够有效地靶向乳腺癌干细胞，而且它消灭乳腺癌干细胞的能力要比传统的化疗药物强很多。后来人们逐渐发现盐霉素还能作用于多种肿瘤干细胞（骨肉瘤、白血病干细胞等）。但是，盐霉素在水中的溶解度比较低，导致了血液中的盐霉素的浓度难以达到治疗的浓度，因此需通过改善盐霉素的制剂方法来提高其在血液中的浓度以此获得更好的治疗效果。

本论文设计、合成具有结构和组成可控特点的负载盐霉素类脂体微球，探索不同制备条件对其结构性能的影响。研究将采用磷酸脂作为类脂体外壳，plga作为载药内核制备获得不同尺寸的类脂体微球，优化制备工艺。制备和表征聚合物微球，研究其作为盐霉素载体的载药量和包封率，研究可控释放性能。

3. 研究的方法与步骤

3.1主动载药方式制备盐霉素脂质体

ph 梯 度 法 (ph-g radient me thod ):根 据henderson-hasselbalch 理论, 每个ph单位的变化 ,会产生分子型与离子型药物质量浓度10倍之差。ph梯度法通过调节脂质体内外水相的 ph 值 ,使内外水相之间形成一定的 ph 梯度差, 弱酸或弱碱药物则顺着 ph 梯度 , 以分子形式跨越磷脂膜而使以离子形式被包封在内水相中。

首先称取15mg的盐霉素固体粉末用95%的甲醇溶解并移至50ml容量瓶定容；50g的碳酸氢钠固体用蒸馏水在1000ml的容量瓶定容；然后准确称取空白脂质体2.0ml、盐霉素药液（3mg/ml）1.0ml、nahco₃溶液0.5ml，在振摇的情况下依次加入10ml西林瓶中（不可调换顺序）摇匀，盖上塞子，在70℃水浴中加热20min。随后立即用冷水降温。

4. 参考文献

1 gupta p b, onder t t, jiang g, et al. identification ofselective inhibitors of cancer stem cells by high-throughput screening.[j].cell, 2009, 138(4):645-59.

2 fuchs d, daniel v, sadeghi m, et al. salinomycin overcomesabc transporter-mediated multidrug and apoptosis resistance in human leukemiastem cell-like kg-1a cells[j]. biochemical biophysical researchcommunications, 2010, 394(4):1098-104.

3 anitha a, deepa n, chennazhi k p, et al. combinatorialanticancer effects of curcumin and 5-fluorouracil loaded thiolated chitosannanoparticles towards colon cancer treatment.[j]. biochimica et biophysicaacta, 2014, 1840(9):2730-43.

5. 计划与进度安排

1、查阅文献资料，完成开题报告（第1～3周）

查阅中外文献资料，综述国内外研究现状和发展趋势等，并进行外文资料翻译。

2、新型类脂体微球的制备研究（第4～10周）