1. 研究目的与意义
背景：系统性红斑狼疮（systemiclupuserythematosus，sle）是自身免疫介导的，以免疫性炎症为突出表现的弥漫性结缔组织病;它是红斑狼疮病谱中病情最重的一型，除皮肤、粘膜损害外，还有各脏器的受累，其中疾病引发的肾功能衰竭是sle患者主要死亡原因之一
意义：1957年ceppelini等首先描述了sle患者血清中存在同脱氧核糖核酸(dna)反应的成分。
1975年stollar等报导了抗dna抗体与sle有密切关系，并认识到抗dna抗体检查对sle的诊断价值。
2. 研究内容和预期目标
hob公司的抗dsdna抗体检测试剂盒（化学发光法）采用间接法原理，是磁微粒分离技术、化学发光检测技术相结合的检测方法。本项目用于定量测定人体血清中的抗dsdnaigg抗体的韩玲，本产品的灵敏度高，重复性好，线性范围宽，并且通用于hob全自动化学发光仪。
预期目标：
1、挑选最佳原料
3. 研究的方法与步骤
1、本实验主要方法是：磁微粒化学发光--间接法 待测抗体与荧光素标记的抗原结合，随后加入包被着抗荧光素抗体的磁微粒，通过抗荧光素抗体与荧光素的特异性结合使抗原抗体复合物连接在磁微粒上，在外加磁场中直接沉淀，去上清后清洗沉淀的复合物，加入酶标抗体，形成磁微粒－抗原－抗体－酶标二抗夹心免疫复合物。再次清洗后，加入酶促化学发光底物。底物在酶作用下被催化裂解，形成不稳定的激发态中间体，当激发态中间体回到基态时便发出光子，形成发光反应，通过光量子阅读系统记录光子能量，并通过计算机处理系统将光能量强度在标准曲线上转换为待测抗体的浓度，并报告 |
2、步骤 （1）加入20μL校准品、质控品或按1/20稀释的待测样本至对应试管中。 （2）加入50μL磁珠试剂至每一试剂管中。 （3）加入50μL生物素标记的抗原试剂至每一试剂管中。 （4）振荡混匀30秒，至37 0.5℃培养箱15分钟。 （5）试管放置磁分离器上，确保试管与磁板接触，沉淀3分钟，缓慢的倒转试管架及分离器倒出上清液后，置吸水纸上将管壁口液体吸干。 加入500μL清洗液至每一试管中，振荡混匀 重复步骤5、6、5三遍 加入150μL碱性磷酸酶标记的抗人IgG抗体至每一试管中 振荡混匀30秒，至37 0.5℃培养箱15分钟。 重复步骤5、6、5三遍。 加入150μL发光底物溶液至试管中，37 0.5℃避光孵育5分钟，用化学发光检测仪进行检测。 |
4. 参考文献
1brinkmnk，termaatr,vandenbrinkh,eta.thespecificityoftheanti-dsdnaelisa.j.immunol.meth.139:91-100(1991).
2conradk.etal.autoantibodiesinsystemicautoimmunediseases-adiagnosticreference;pabstsciencepublisher,lengerich,berlin,riga,rom,viernheim,wien,zagreb,2002
3nakamurarm,tanem.recentadvancesinlaboratorytestsandthesignificanceofautoantibodiestonuclearantigensinsystemicrheumaticdieases.clinicsinlaboratorymedicine6:41-53(1986)
5. 计划与进度安排
一、2022.1.1-2022.2.25阅读文献，完成综述
二、2022.2.26-2022.3.30进行实验用生物的培养
三、2022.4.1-2022.4.25对spanlang=en-usstyle="background:white;color:black;font-family:arial;mso-bidi-font-size:10.5pt"sle/span的含量检测
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