植物酯酶的提取及纯化研究开题报告

1. 研究目的与意义

植物酯酶的提取及纯化研究研究表明，有机磷农药对植物酯酶产生抑制作用，且植物酯酶源丰富，取材方便，制备简单，可利用植物酶的抑制技术测定果蔬中有机磷和氨基甲酸酯类农药。

而酶的提取方法对酶的活力和纯度以及对农药的敏感程度有着重要影响。

本文研究提取液浓度、提取温度、提取时间对酶活性的影响，通过试验确定其最佳提取工艺，为酶提取、分离和纯化方法的建立打下基础。

2. 国内外研究现状分析

关于酯酶的提取纯化，国外的研究大多集中在从假丝酵母、霉菌、假单胞菌、细菌、链球菌、乳酸菌、醋酸菌等菌类中提取，只见到christinaestuhleflder等通过硫酸钱盐析沉淀、q一speharose层析等步骤提取西红柿中的植物酯酶。

国内也仅见到纪淑娟等通过水提取、离心、硫酸馁盐析沉淀以及sephadex g200凝胶层析从小麦种子中提纯醋酶。

关于农药残留检测用植物酷酶的来源，近年来有很多的研究报道直接以市售面粉作为酶原，用面粉中的植物醋酶检测农药残留，在面粉中按一定比例加入蒸馏水，振荡离心所得溶液即为检测用的脂酶溶液。

3. 研究的基本内容与计划

（1）植物酯酶的溶剂提取条件的确定如：溶液的种类、固液比、温度、时间等。

（2）纯化条件如超滤、凝胶、离子交换等条件的确定。

（3）经纯化后的纯酶的酶学性质如：热稳定性、ph稳定性、金属对酶活性的影响。

4. 研究创新点

国内少见有研究将小麦酯酶进行进一步纯化，本研究不仅确认粗酶液提取的条件，还运用多种提纯方法将酶液进行进一步纯化，并测试其性质，为农药酶抑制法检测提供更好的酶源。