1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
胞外聚合物主要是由细菌、真菌、病毒和原生动物等微生物所产生[1]。
天然环境存在大量的各种各样的微生物,能不断地通过新陈代谢释放eps到环境中。
研究表明,海洋环境中有多达50%可溶性有机质(dom)是来自于微生物所释放的eps[2]。
2. 研究的基本内容和问题
目标:去除鞘氨醇杆菌的胞外多聚物,研究去除胞外多聚物(eps)对鞘氨醇杆菌接合效率的影响。
内容:提取鞘氨醇杆菌的胞外多聚物可采用物理方法(高速离心法、热提取法、超声波法)和化学方法(阳离子交换树脂法、naoh提取法、h2so4提取法)等,可通过各种方法的提取量和提取效率来决定采用何种提取方法。
比较去除eps的鞘氨醇杆菌与受体菌的接合和未去除eps的鞘氨醇杆菌与该受体菌种的接合情况,来研究去除胞外多聚物(eps)对鞘氨醇杆菌接合效率的影响。
3. 研究的方法与方案
1.拟采取的研究方案培养鞘氨醇杆菌单菌落,分为实验组和空白组,实验组去除eps,空白组不做处理。
提取鞘氨醇杆菌的胞外多聚物可采用物理方法(高速离心法、热提取法、超声波法)和化学方法(阳离子交换树脂法、naoh提取法、h2so4提取法)等。
培养受体菌:将目的基因通过基因工程转移到受体菌内。
4. 研究创新点
鞘氨醇杆菌的广泛分布、其对复杂结构的难降解芳香化合物的特异降解作用,以及在生物聚合物的生产方面的优越性使其受到越来越多的关注。
但是由于对其认识较晚,目前对鞘氨醇杆菌的研究多数停留在初级阶段,目前主要的报道多集中在该菌属菌株的分离,降解途经、降解条件优化以及降解产物的分析等方面,而去除eps是否会影响外源基因通过接合作用进入鞘氨醇杆菌尚不清楚。
基于此,本研究以鞘氨醇杆菌为例,探讨去除eps对鞘氨醇杆菌接合效率的影响,研究结果可为在实验室条件下更好地实现鞘脂类细菌的基因水平转移提供理论依据。
5. 研究计划与进展
2018年1月-2018年2月 文献的阅读; 2018年2月-2018年4月 实验技术的学习,进行实验及其数据统计; 2018年4月-2018年5月 整理分析实验结果,提交结题报告。
