放线菌初步鉴定及其制备黄瓜种子包衣对发芽与抗病的影响开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

本课题的意义：黄瓜的营养价值高，富含纤维素、多种维生素和矿质元素，并具有抗肿瘤等食疗作用[1]，但黄瓜生长过程中会受到各种病害的侵染，影响黄瓜的品质和产量，其中，黄瓜枯萎病是一种危害严重的土传病害，采用化学农药防治效果不佳，且易造成环境污染、农药残留等问题。

研究证明生防放线菌能修复作物连作障碍，促进作物生长[2]，因此，研究生防放线菌对黄瓜生长的效应对黄瓜栽培和病害防治具有重要意义。

放线菌是抗生素等一些有较高价值的生理活性物质的产生菌, 在医药、农业等多方面有着广泛的应用, 但其发酵产物在复杂的多相系统中, 除了微量的抗生素和菌丝体外, 还有很多杂质, 杂质的含量为抗生素浓度的几十倍、几百倍甚至几千倍[3]。

2. 研究的基本内容和问题

研究目标:对放线菌d04进行初步鉴定，制备黄瓜种子包衣。

内容： 1、明确放线菌d04在植物病害生物防治中的应用潜力，通过形态观察、生理生化测定，对放线菌d04进行初步鉴定。

2、用放线菌d04制备黄瓜种子包衣，研究生防放线菌种子包衣对黄瓜种子发芽、生长的影响。

3. 研究的方法与方案

研究方法： 1. 菌株鉴定 形态观察 参照《微生物分类学》中的插片法观察菌株形态特征，在高氏一号培养基平板上28 ℃培养7、14 d 后，观察并记录菌落形态、基内菌丝、气生菌丝和孢子丝的形态、颜色，以及是否产生可溶性色素等。 2. 放线菌发酵液的理化性质 参照文献《微生物分类学》进行。 3. 放线菌d04孢子制备及固体发酵在固体平板上制备放线菌孢子，用麸皮等农副产品固体发酵d04 4. 黄瓜种子包衣制备 包衣剂由放线菌孢子、放线菌发酵产物、成膜剂、扩散剂、稳定剂、着色剂等制成，包裹于黄瓜种子表面，进行发芽实验。 5. 种子发芽率测定用保湿培养法，取两层滤纸平展在φ=15cm的玻璃培养皿中并充分吸水,将包衣种子与未包衣种子摆放在吸水纸上,每处理一皿,每皿20粒, 3次重复。培养箱中培养,培养温度(251)℃。发芽期间,每日记录发芽数,14d后计算发芽率。 6. 盆栽试验检测其防病效果 蛭石盆栽检测经种衣剂包裹的黄瓜种子幼苗是否具备拮抗作用和防病效果。 实验方案：对分离的放线菌进行培养，测定该放线菌发酵液的理化性质，包括菌株形态、热稳定性等，用放线菌孢子制备种子包衣剂，可以不同浓度，包裹于黄瓜种子表面，进行盆栽实验，测定各盆栽的发芽率及幼苗长势。 可行性分析：在种植土壤中人为施用生防放线菌制剂，由于放线菌能够在土壤中长期生存且大量繁殖成为优势微生物，并产生具有抑制作用的抗生素，使黄瓜根区微生物区系保持正常状态，进而控制黄瓜土传病害 的发生。但在防治土传病害的同时，生防放线菌也会对黄瓜生长造成一定影响，如果使用不当，不仅不能达到高产优质的目的，还会影响经济效益。如本研究中，在使用菌粉包衣黄瓜种子时，放线菌制剂浓度对黄瓜种子的发芽率及出苗后的生长有明显影响，浓度过高或过低均不利于黄瓜生长。综上，本实验可以得出对预期实验结果的结论，因此是可行的。

技术路线：

4. 研究创新点

特色或创新之处种子包衣是目前种子处理的一个最为行之有效的方法, 也是种子工程的重要内容。

传统的种子包衣材料中的有效成分主要是化学农药。

因为众所周知, 化学农药作为种子包衣材料起到了（1）防治病虫害;（2）促进幼苗生长、提高作物产量; ( 3) 减少田间用药次数; ( 4) 省工省种; ( 5) 利于机械化播种等优点; 但同时也存在( 1) 植物药害; ( 2) 环境污染; ( 3) 人、畜毒害; ( 4) 病、虫抗药性; ( 5) 降低种子发芽率等不可忽视的不利因素。

5. 研究计划与进展

研究计划及预期进展 2014年3月上旬2014年3月中旬：根据确定的毕业论文题目来查阅相关文献，撰写实验方案； 2014年3月中旬2014年3月下旬：根据实验方案收集实验材料以及进行前期的预实验，进行菌种的培养； 2014年3月下旬2014年4月上旬：进行正式试验，测定相关量； 2014年4月上旬2014年5月：实验数据处理和结果分析以及论文的撰写。