阿特拉津降解微生物筛选及其对阿特拉津降解效果研究开题报告

 2022-04-12 07:04

1. 研究目的与意义

1.1 课题研究背景

阿特拉津是一种在世界范围内广泛使用的中等偏低毒性除草剂,国外使用该除草剂已有2%年历史,曾被认为是生态安全的除草剂,由于使用量大、残留期长,农田施用后随着地表径流、淋溶、沉降等多种途径进入地表水和地下水,它在水中能抵抗自然的递降分解作用,从而对水生态系统和饮用水源构成威胁,近来不断有阿特拉津污染事件的报道,已有的研究证明阿特拉津对动物的生殖功能有极大的影响,被世界野生动物基金会(667)列为环境荷尔蒙(内分泌干扰剂)的可疑物质,有扰乱内分泌的作用。[]

1.1.1 阿特拉津的性质

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2. 研究内容和预期目标

1.国内外研究现状综述

2.阿特拉津降解菌的富集、筛选:取3-4种长期施用阿特拉津的农田土壤,并利用以阿特拉津为氮源的方法富集、筛选能降解阿特拉津的菌种.首先得寻找长期使用阿特拉津的农用地,从农用地中采取一些土壤。阿特拉津具有一定毒性,首先考虑的就是在阿特拉津毒性作用下,能够生长下来的细菌。长期使用阿特拉津的农用地就是最好的选择。主要考虑对阿特拉津的耐受性,所以培养菌种的选择传统的msn培养基配合10mg/l的阿特拉津溶液。浓度太低无法进行耐受性挑选,太高也不行。其中阿特拉津无法溶于水,但溶于甲醇。但甲醇对阿特拉津降解菌也有一定影响,这影响要考虑进去。经过三次的纯化来对该土壤中的阿特拉津降解菌进行筛选,每次取5ml液体到新培养基中,并且再加入同量的阿特拉津溶液。这样可以对土壤中的阿特拉津降解菌进行进一步的筛选。之后通过菌种培养方法,进行培养。培养完毕后加入阿特拉津,通过降解,再在液相色谱仪测定。

3.阿特拉津降解菌的生理生化鉴定,阿特拉津降解菌的生理生化鉴定,通过糖类分解试验(分解碳源是否产生有机酸),v-p 试验(在强碱条件下是否产生丙酮酸),甲基红试验(丙酮酸是否能进一步被分解),柠檬酸盐利用试验,硝酸盐还原试验,淀粉水解试验,吲哚(靛基质)试验(其中有没有含有色氨酸酶)来确定阿特拉津降解菌的特性。

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3. 研究的方法与步骤

1、阿特拉津降解菌的筛选和培养 阿特拉津降解菌的富集、筛选

(1)配置500mlmsn盐培养基(mgso4.7h2o0.05g,k2hpo4:0.50g,kh2po4:0.5g,feso4.7h2o:0.0125 g;cacl2:0.0125g,h2o 500ml,ph 7.0)。[]分别添加到五个250ml的锥形瓶中,并且封口,然后置于灭菌箱三个小时,若灭菌箱缺水,就加水,并且18分钟后将门阀关闭,关闭后再将阀门转回10°左右。

(2)配置阿特拉津溶液,以甲醇溶液为溶剂,配置5ml的10mg/l的阿特拉津溶液。

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4. 参考文献

[1]刘丹丹,孙宛玉,刘畅,马浩珂,王瑞娇,隋宇凡.菌株enterobacter sp.降解除草剂阿特拉津产物测定及降解基因克隆[j].河南农业科学,2019,48(10):70-76.

[2]石宝明,刘洋,白广栋,单安山.饲料中农药残留对动物的毒性作用及其消除技术研究进展[j].动物营养学报,2020,32(10):4785-4792.

[3]李阳阳,张金波,沙君雪,史琛琛,迟宝岩,高继国,李海涛,刘荣梅.阿特拉津降解菌ly-2的分离鉴定及其对污染土壤的修复[j].农业生物技术学报,2018,26(06):987-994.

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5. 计划与进度安排

(1)2021年2月15日~2022年2月28日 完成英文翻译;接受毕业设计任务书,查阅资料,编写并完成开题报告(国内外文献综述、实验方案)。

(2)2021年3月1日~2021年5月15日 开展相关实验,进行数据分析,编写毕业论文初稿

(3)2021年5月16日~2021年5月31日 毕业论文定稿

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