水稻OsSHMT4基因回补拟南芥Atshmt7突变体的功能验证开题报告

 2022-01-21 09:01

1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)

1.研究意义水稻是世界上最重要的粮食作物之一,因此研究水稻光合作用与呼吸作用的影响因素,调节代谢速率以及物质积累,以提高水稻产量和产品质量就格外重要。

在基因组全序列的获得和大规模突变体库的建立的基础上,从分子生物学的层次研究水稻中各基因的功能、表达方式,并利用生物学手段加以控制,在以提高产量为目标的背景下具有重要意义。

本研究希望通过研究回补水稻中osshmt4基因后的拟南芥atshmt7突变体材料是否仍然具有高硫积累的表型,来验证osshmt4基因在水稻中调控的功能。

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2. 研究的基本内容和问题

1.研究的目标、内容本次实验的主要思路是培养拟南芥atshmt7突变体材料以及回补了水稻osshmt4基因的材料,并测量根部和叶部的s和se含量,与野生型col-0进行比较,以验证osshmt4基因是否具有和atshmt7基因的相似功能,并对其功能进行进一步的分析验证。

2.拟解决的关键问题本次实验重在对水稻中同源基因osshmt4进行功能验证,研究osshmt4是否具有与atshmt7相似的功能。

拟南芥atshmt7突变体材料表现为地上部高硫积累,而水稻中的同源基因osshmt4是否具有相似的功能是本次实验研究的主要问题。

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3. 研究的方法与方案

1.研究方法通过在拟南芥突变体材料中回补水稻osshmt4基因,进行培养后观察表型,测量地上部与根部的s和se含量,与野生型进行对比,来验证osshmt4基因是否具有和atshmt7基因相同的表型。

2.技术路线见附件3.实验方法3.1 培养基的配置在1/2ms培养基上培养拟南芥种子。

培养基上加入卡那霉素筛选出成功转入目的基因的拟南芥种子。

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4. 研究创新点

本实验的创新之处在于验证水稻OsSHMT4基因的功能时,没有将实验目标单一放在水稻样品上,而是将目的基因转基因到拟南芥突变体中,从同源基因的角度猜想并验证其功能,节省了一步步排除其控制功能的时间,节约了成本,同时使其功能验证更加完整,严密。

5. 研究计划与进展

截至目前为止(3月7日),本次实验已经完成拟南芥移苗处理,预计在3月26-31日对拟南芥样品进行元素含量测量,4月10日前完成数据分析处理。

按照预期计划,能在规定时间内完成本次实验。

预期通过实验能够验证水稻osshmt4基因表达的功能,通过其在拟南芥突变体中的表达出的性状分析出其是否具有和atshmt7基因相似的功能。

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