畜禽粪便中雌激素降解菌的筛选开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

当前、环境雌激素污染问题备受各国政府和学者关注，被喻为威胁人类存亡的一个定时炸弹。

养殖业畜禽粪便是环境雌激素的重要来源之一，每年大量的雌激素随畜禽粪便排入环境，对土壤、地表水和地下水环境造成污染，严重威胁人类和动物的安全与健康。

本项目旨在筛选具有高效降解雌激素特性的降解菌，试图为构建高效、快速去除养殖业畜禽粪便中雌激素的可行技术提供重要思路。

2. 研究的基本内容和问题

研究目标：从畜禽粪便中分离、筛选、鉴定出具有雌激素降解特性的降解菌株。

分析降解菌对雌激素的降解性能，表征其生物性状。

研究内容：(1)筛选具有高效降解雌激素特性的降解菌。

3. 研究的方法与方案

雌激素选用畜禽粪便中常见的天然雌激素17β-雌二醇(e2β)、雌酮(e1)、17α-雌二醇(e2α)和雌三醇(e3)、具体过程如下：制备用于雌激素降解菌分离和培养的无机盐培养基和用于菌体保存及菌悬液制备的lb培养基；将雌激素溶于丙酮，加入到100ml灭菌的无机盐培养基，使雌激素浓度为1mg/l，水浴下加热培养基，待丙酮完全蒸发后将20g畜禽粪便加入到培养基中振荡培养(30℃, 150r/min),每6～7d更换一次营养液、重复4次及以上，以富集雌激素降解菌，淘汰对雌激素敏感的微生物，用液相检测富集液对雌激素的降解效果；若有效果，驯化结束以后，在琼脂平板上多次划线分离直到得到可降解雌激素的单菌落。

从纯化平板上的菌落形态来观察降解菌的群体形态特征，通过革兰氏染色、芽孢染色观察降解菌的个体形态特征；测定分离出的降解菌的生理生化指标(东秀珠，常见细菌系统鉴定手册，科学出版社，2001),明确分离筛选的降解菌的种群特性。

可行性分析：选题上，本项目针对畜禽粪便中雌激素污染治理的现实要求，尝试从畜禽粪便中分离、筛选具有雌激素降解特性的降解菌，研究其对雌激素的降解作用及机理，有望提出有效治理畜禽粪便中雌激素污染、规避雌激素环境污染风险的途径和思路；具有重要的实际意义和坚实的理论基础。

4. 研究创新点

以往文献中报道的雌激素降解菌多是从污泥、土壤等介质中获得，本项目尝试从畜禽粪便中直接分离、筛选具有雌激素降解特性的降解菌，并用于降解畜禽粪便中雌激素，所获取的菌株将能更佳地适应畜禽粪便的生存环境，有望产生更好的降解效果。

5. 研究计划与进展

2015年3月上至4月上，从畜禽粪便中分离筛选具有降解特性的雌激素降解菌，并通过菌体形态观察、生理生化指标鉴定，表征其生物学性状、分析其降解性能；因畜禽粪便中并不容易筛选到雌激素降菌，故另安排2015年4月上至5月上，从活性污泥中尝试分离筛选具有降解特性的雌激素降解菌，并通过菌体形态观察、生理生化指标鉴定，表征其生物学性状、分析其降解性能。

最终完成本科生毕业论文。