茶树ALS1基因对铝毒耐性的功能性验证开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

铁虽然是自然界存在的最丰富的元素之一。

但是由于受土壤ph值和氧的影响，铁在土壤中经常以比较稳定的氧化物sef 的形式存在，在水中的溶解度很低，能被植物直接吸收的铁只占很小的比例[1]。

特别是由于我国北方大部分的土壤为碱性土壤，尽管铁的含量很高，但可被植物吸收利用的可溶性铁的含量却不到10-10moll，在这种情况下，很多植物表现出缺铁失绿症。

2. 研究的基本内容和问题

研究目标　　探究酵母中拟南芥lpr1与lpr2基因对铁胁迫的响应。

研究内容　　通过平板试验，比较转入空载pyes2.0的酵母与转入分别重组了拟南芥lpr1与lpr2基因的pyes2.0的酵母对铁胁迫的生长差异。

拟解决问题　　拟南芥lpr1与lpr2基因是否对铁胁迫有重要作用。

3. 研究的方法与方案

通过重组法获得拟南芥LPR1与LPR2基因pcr产物，以pYES 2.0质粒构建载体并转入Trans-T1感受态中，培养获得大量纯化质粒并测序检验正确后，将载体转入感受态酵母细胞培养，最后在合适的OD时将酵母接种于Fe浓度梯度处理板上观察结果。

4. 研究创新点

通过在酵母中异源表达拟南芥LPR1与LPR2基因，研究该基因表达产物对铁胁迫的响应机制。

5. 研究计划与进展

3月10日-3月15日　　预实验；熟练实验操作以及仪器使用，设置合理的铁胁迫浓度范围。

3月16日-3月19日　　前期准备；构建载体并配制铁浓度梯度处理板，进一步完成后续实验规划做好仪器预约等工作。

3月20日-4月25日　　通过重复多次的平板试验，比较转入空载pyes2.0的酵母与转入分别重组了拟南芥lpr1与lpr2基因的pyes2.0的酵母对铁胁迫的生长差异。