常见土壤脲酶活性测定方法的纯酶验证开题报告

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1. 研究目的与意义

目的：随着科学的进步，人们由原来片面强调对酶活性影响结果的研究，转向既重视结果，又重视产生该结果的过程的研究[5]。

目前，有研究者对于无土和无基质对照的设立和培养过程、抑制剂的使用有一定的研究，但是对于不同的浸提剂，不同的抑制剂，不同的沉积样品的对照设立方法效应缺乏探讨。

因此，本实验就这一不足进行优化与改进，为脲酶方法的选择、优化和改进研究提供理论与实践依据。

2. 国内外研究现状分析

国外对脲酶和脲酶抑制剂的研究较早，国外学者rotini于1935年就发现了土壤中所存在的脲酶，在20世纪40年代国外就有学者提出，将某些物质施入土壤中可以抑制脲酶的活性，从而提高氮肥的利用效率。

后来conrad等人经过大量的实验为土壤中确实存在脲酶提供了确凿的证据，并揭示出尿素在土壤中的水解转化的重要因素是土壤脲酶催化作用所导致的。

1971年bremner等人从上百种化合物中筛选出对脲酶抑制效果较好的醌类化合物以及银和汞有机化合物。

3. 研究的基本内容与计划

研究内容： 在一定的温度下，分别按照无甲苯法，甲苯法、关松荫方法测定脲酶纯酶活性，然后进行三种脲酶活性测定方法浸提剂的纯酶比较以及三种脲酶活性测定方法对照处理的纯酶比较。

研究计划：1．搜集资料，熟悉课题 ，完成开题报告和文献综述 2周2．根据文献拟定总体实验步骤2.5周3．进行实验的前期准备1.5周4．实验过程及数据获取5周5．数据处理及论文撰写3周6．准备答辩讲稿、进行答辩1周

4. 研究创新点

1.对于不同的浸提剂对结果的影响，不同沉积样品的响应情况缺乏探讨，本课题对于具有三种脲酶活性测定方法进行比较，特别是对不同的浸提剂、抑制剂和对照设立方法的效应进行解析，为脲酶方法的选择、优化和改进研究提供理论与实践依据。

2.不同的方法中关于对照的设立有较大差异，目前，有研究者对于无土和无基质对照的设立和培养过程、抑制剂的使用研究较为注重，但对于不同的对照差异对脲酶活性测定结果的影响研究较为缺乏，本课题明确了对照处理设置的重要性，并提出其优化的方法。