纤维素酶的分离与表征开题报告

 2021-08-08 22:52:57

1. 研究目的与意义

纤维素酶自发现以来,已广泛应用于医学、食品、造纸等行业。

纤维素酶是一种多组分复合酶,一个纤维素酶系通常有十几到几十个纤维素酶组分,而且内切酶和外切酶之间的分子量和等电点均相差很小,使得纤维素酶的分离纯化工作较为困难 。

纤维素是自然界中年产量巨大的可再生资源,如何成功地开发这一资源,对人类的可持续发展具有重要意义。

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2. 国内外研究现状分析

⒈离子交换层析由于酶蛋白分子表面电荷的不均一性 ,对离子交换剂表现了不同的亲和力,且离子交换剂与酶蛋白分子之间的亲和力不仅取决于酶分子表面携带电荷数目多寡,而且与其分子内电荷排布有关;而在离子交换层析中,只有分布在蛋白质分子亲水表面的电荷才发挥作用,而存在于分子疏水核心中的电荷在离子交换中不起作用。

因而,一个简单的洗脱条件很难将多种酶蛋白分离开来,往往需要复杂的洗脱条件才能得到纯酶。

孙乐常[1]等采用sp-sepharose 阳离子葡聚糖凝胶交换柱层析、sephacryl s-200 丙烯葡聚糖凝胶柱层析和hydroxyapatite羟基磷灰石柱层析,从九孔鲍鱼消化腺中分离纯化到1 种纤维素酶;王剑锋[2]等在黑曲霉水解京尼平苷β-葡萄糖苷酶的分离纯化时, 粗酶液经乙醇沉淀和deae-sepharose fast flow 离子交换层析, 获得了两种电泳纯的β-葡萄糖苷酶, 它们的相对分子质量分别为102 kda、97 kda,总酶活回收率达到48 %。

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3. 研究的基本内容与计划

1.浆料的准备;2.分离纤维素酶的内切与外切组分;2. 对分离的酶进行活性表征;3. 木纤维的酶法改性研究,纤维素酶改性阔叶木纤维工艺条件的优化。

4. 研究创新点

通过木纤维的酶法改性研究,对纤维素酶改性阔叶木纤维工艺条件的优化,从而实验出最好的纤维素酶的分离方法,从而提高纤维素酶的开发利用,减少能源的浪费并降低污染。用超声波制备NCC中降低能耗,同时优化NCC的形态、分布、DP。

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