1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
猪流行性腹泻(porcineepidemic diarrhea,ped)是由猪流行性腹泻病毒(porcineepidemic diarrhea virus,pedv)引起的以腹泻、呕吐、脱水和对哺乳仔猪高致死率为特征的高度接触性肠道传染病。ped于1978年在英国和比利时首次报道,此后中国、加拿大、匈牙利、德国、日本、韩国等多个国家相继报道了该病的发生。pedv主要通过感染动物的粪便等污染物经消化道感染,各种年龄的猪均可发病,哺乳仔猪受害最严重,平均致死率为50%[1]。
1 pedv的形态特征与理化特性
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2. 研究的基本内容和问题
1 研究的目标
本实验旨在通过构建猪流行性腹泻病毒s1基因重组表达载体原核表达s1重组蛋白,经纯化后作为抗原免疫小鼠制备抗猪流行性腹泻病毒coe单克隆抗体,并筛选出能特异性结合pedv的单克隆抗体。
2 研究的内容
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3. 研究的方法与方案
研究方法、技术路线、实验方案及可行性分析
1 研究方法
(1)文献法:了解pedv分子生物学和单克隆抗体的研究进展,根据已有文献设计具体实验方案。
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4. 研究创新点
1 构建了S1基因原核表达的最佳诱导条件。
2 为抗PEDV COE抗原表位单克隆抗体的制备提供了流程参考。
5. 研究计划与进展
1 研究计划
1-2周:完成目的基因的原核表达,得到纯化目的蛋白。
3-7周:完成动物免疫,取得脾细胞。
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