效应因子PSAuh23和大豆蛋白GmSRC2的BIFC载体的构建开题报告

 2022-02-07 20:51:29

1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)

大豆(glycine max(l.) merr)是重要的经济作物,具有粮、油、饲料等经济功能,在世界各国的农业生产中都扮演着重要角色,然而大豆容易受到多种病原物的侵害,卵菌就是其中一种。

卵菌(oomycetes)是一类能够引起动植物严重病害的病原菌[1],约60的卵菌是植物病原菌,其中包括疫霉属[2]。有研究表明,超过100种疫霉品种引起的植物病害会给植物生产带来毁灭性的打击,给世界各国的农业生产带来了巨大的损失[3],例如大豆茎腐病、葡萄霜霉菌、辣椒疫霉病、樱桃茎腐病。植物和病原菌之间的互作,一方面是病原菌入侵寄主植物组织,从中获取养分,完成自身生命周期;另一方面是植物通过物理防御、化学防御及免疫系统等机制试图阻止病原菌的入侵,使自己存活下来[4,5]。大豆疫霉作为半活体营养病原菌,侵染分为两个阶段,第一个阶段它从寄主植物中汲取养分供自身生长发育,第二个阶段它将寄主植物杀死并继续利用死体营养物质,效应因子作为协助病原菌入侵、调控植物细胞死亡的重要物质,可能在这个过程中起到了至关重要的作用[5,6]

植物通过物理防御病原菌的能力较弱,它们在长期的进化中发展出了复杂的免疫系统来抵御病原的入侵,其中分为两种模式:pamp诱导免疫反应(pamp-triggeredimmunity, pti)和效应因子诱导免疫反应(effect-triggered immunity, eti)[2]。第一种免疫反应是由于植物细胞膜的受体识别到由病原分泌的病原相关分子而诱导的,随着进化,病原物分泌出能够抑制寄主植物pti的效应因子,植物也分泌编码抗性蛋白到细胞外与这些效应因子识别,进而引发更为激烈的免疫反应,也就是第二种免疫反应,eti[7]。eti可以有效的抵御大量的潜在的病原菌的入侵[8]

剩余内容已隐藏,您需要先支付后才能查看该篇文章全部内容!

2. 研究的基本内容和问题

1.研究目标:已知一个效应因子能够引起植物的过敏hr反应,通过生物学信息分析,筛选到一个效应因子psavh23,实验室前期研究通过酵母双杂技术,确定了一个和效应因子psavh23互作的大豆冷协调蛋白gmsrc2,本课题将验证该大豆蛋白,并利用双分子荧光互补技术继续验证两者之间的互作。

2.研究内容:

2.1基因克隆及表达载体的构建

剩余内容已隐藏,您需要先支付后才能查看该篇文章全部内容!

3. 研究的方法与方案

1.研究方法:

1.1 同源重组法构建载体

1.2 通过双分子荧光互补技术验证效应因子psavh23和大豆冷协调蛋白gmsrc2之间的互作

剩余内容已隐藏,您需要先支付后才能查看该篇文章全部内容!

4. 研究创新点

病原物分泌的效应因子在病原物侵染寄主植物的过程中,可能发挥干扰甚至破坏植物细胞的代谢,以破坏其防御功能的重要作用,但其与寄主植物互作的机理在很大程度上仍未被探索。实验室前期的研究中发现的大豆疫霉菌效应因子PsAvh23和可能与之互作的大豆冷协调蛋白GmSRC2是否互作对进一步解析大豆疫霉菌的侵染和大豆的防御机制有重要意义。

5. 研究计划与进展

1. 研究计划

2019年9-10月:项目理论预备,阅读大豆疫霉根腐病以及效应因子相关文献;

2019年11-12月:通过同源重组法构建psat1-neyep-c1过表达载体和psat1-ceyep-c1过表达载体;

剩余内容已隐藏,您需要先支付 10元 才能查看该篇文章全部内容!立即支付

发小红书推广免费获取该资料资格。点击链接进入获取推广文案即可: Ai一键组稿 | 降AI率 | 降重复率 | 论文一键排版