1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
油菜素内酯(brassinosteroids, brs)是继生长素、赤霉素、细胞分裂素、脱落酸和乙烯之后发现的第六大类植物激素，参与多种生物学过程。
油菜素内酯最先在油菜(brassica napus l.)花粉的提取物中被发现，是一种能促进植物生长和大豆茎伸长的物质，称为油菜素(brassin)[1][2]。
80年代以后, 研究者通过人工合成或从自然界分离、鉴定出众多的br化合物。
2. 研究的基本内容和问题
一、研究目标：已知gsk2和gsk3通过负向调控油菜素内酯信号通路影响水稻籽粒发育的分子机制，本课题将解析水稻gsk基因家族的功能，并研究gsk蛋白家族与osppkl1的关系，从而解析调控水稻籽粒发育的遗传网络，为 osppkl1 的分子育种利用提供理论依据。
二、研究内容（1） gsk的分子特性研究gsk3和gsk2是水稻粒长的负调控因子，系统发生分析表明 gsk 与 bin2位于同一分支，为了研究gsk是否通过参与油菜素内酯信号途径影响水稻籽粒发育，首先我们将研究gsk的分子特性，包括亚细胞定位变化是否受br相关激素影响和osppkl1去磷酸化活性等。
（2） gsk的生物学功能研究我们已经获得了 gsk1 ,gsk3和gsk5的t-dna 插入突变体。
3. 研究的方法与方案
一．研究方法（1）亚细胞定位：参考方法（sun 等, mol biotech, 2012, 52101110）进行水稻原生质体的制备和转化。
首先构建 osppk1及其互作蛋白与绿色荧光蛋白 gfp 融合表达载体。
取 2 周的水稻幼苗叶片进行原生质体的制备。
4. 研究创新点
特色或创新之处（1）本课题创新之处包括研究gsk基因是否水稻油菜素内酯信号途径，这一研究丰富了油菜素内酯信号途径，为后期对该信号途径的研究奠定基础。
该基因家族的功能研究对于理解水稻籽粒发育的分子机理具有重要的价值。
（2）gsk与拟南芥bin2是同源基因，bin2在拟南芥中负向调控油菜素内酯信号途径影响植株发育。
5. 研究计划与进展
研究计划及预期进展2017年7月-8月：pGEX2T-GSKs原核表达载体构建；2017年9月-11月：OsGSKs蛋白诱导纯化；pCAMBIA1300s-GFP-GSKs载体构建；2017年12月：pAN580-GSKs载体构建；原生质体制备及质粒转化；2018年1月：农杆菌介导的烟草表皮细胞侵染，确定不同处理条件对GSKs在水稻中的定位是否产生影响；GSKs体外去磷酸化分析；2018年2月：生物信息学分析；2018年3月-4月：毕业论文撰写。
