MtMYB1和GmMYB182的遗传转化研究开题报告

 2022-02-08 20:16:41

1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)

一、课题意义生殖过程是高等植物生活史中最重要的一个阶段,也是农业生产获得产品,提高产量的关键时期,因此和植物生殖密切相关的花器官发育一直是植物学家的研究重点之一。

研究花发育相关基因对研究花器官的形成和发育具有重要作用,对农业生产也有重要的理论意义和应用前景。

本研究通过遗传转化的方法研究了大豆和蒺藜苜蓿两个花发育相关的myb转录因子基因的功能,为大豆和蒺藜苜蓿的分子育种提供理论依据。

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2. 研究的基本内容和问题

研究目标通过农杆菌介导的植物遗传转化方法,以蒺藜苜蓿和拟南芥作为研究材料,通过研究转基因植株中的表型变化从而探究蒺藜苜蓿r108和大豆williams 82中克隆的花发育相关基因mtmyb1和gmmyb182的功能。

研究内容将已经克隆的的1个大豆的基因gmmyb182和1个蒺藜苜蓿的基因mtmyb1以蒺藜苜蓿和拟南芥作为研究材料使用根癌农杆菌介导进行遗传转化;对转化植株进行筛选与鉴定后进行表型分析。

拟解决的关键问题获得mtmyb1和gmmyb182基因阳性转化植株,分析mtmyb1和gmmyb182基因在转化植株中所引起的表型变化进而分析基因的功能。

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3. 研究的方法与方案

研究方法研究使用gateway重组法构建过表达载体;使用ctab法提取基因组dna;用根癌农杆菌介导蒺藜苜蓿和拟南芥的遗传转化;用抗生素筛选转基因植株种子以及使用pcr进行阳性植株的鉴定;对t1代转基因植株进行表型分析。

技术路线与实验方案见附件可行性分析选用蒺藜苜蓿和拟南芥作为受体植株进行遗传转化相对容易,且由于二者生育期短,可以在有限的时间内获得结果。

以农杆菌介导的遗传转化相关的原理、过程、影响因素、筛选鉴定等方面的研究已经相当成熟。

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4. 研究创新点

1、对转基因拟南芥进行研究,探究目标基因在花发育、果实发育、株型调控等方面的功能。

2、实验中另一对象为豆科模式植物蒺藜苜蓿,可以对同一基因在不同的模式植物中的功能进行比较。

5. 研究计划与进展

研究计划2016年9月 构建过表达载体2016年10月-12月 拟南芥的培养与遗传转化2016年10月-2017年3月 蒺藜苜蓿的培养与遗传转化2017年1月-2月 T0代植株种子筛选,T1代种子种植,准备中期检查2017年3月-4月 T1代转基因植株表型鉴定与分析,撰写论文预期进展1、获得MtMYB1和GmMYB182基因阳性转化植株;2、分析MtMYB1和GmMYB182基因在转化植株中所引起的表型变化进而分析基因的功能;3、完成一篇本科毕业论文。

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