水稻粉质突变体W9142突变基因的克隆和初步分析开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

1. 本课题意义：

水稻属于颖果，其贮藏性物质主要存在于胚乳中。贮藏蛋白主要存在于紧挨着糊粉层的两层亚糊粉层细胞内。水稻中蛋白体有两种类型，一种呈圆形，直径在一个微米左右，称为一型蛋白体（protein body i，pbi）^[1]。水稻中谷蛋白和球蛋白可以被人体吸收利用，而醇溶蛋白质因贮藏在致密的pbi中，不能被人体消化吸收。通过提高水稻中谷蛋白的含量可以提升稻米的营养品质，这对新品种培育来说有重要意义。与此同时，大量吸收谷蛋白对某些特定人群如肾脏疾病患者来说会造成病情的恶化，也可以通过降低谷蛋白含量来培育适合特殊人群食用的水稻新品种。

2. 国内外研究概况

2. 研究的基本内容和问题

对此水稻蛋白突变体进行表型的鉴定、显微观察，并进行突变基因的精细定位，为后续的基因克隆奠定基础。

2.研究内容

1) 利用已经构建的f2群体进行精细定位；

3. 研究的方法与方案

1.1 dna提取

1) 将选取的突变体的叶片剪碎于2ml小管中，加入钢珠并用液氮打碎 ；

2) 在小管中分别加入sds 600μl 65℃水浴30min；

4. 研究创新点

谷蛋白转运途径是禾本科蛋白转运的模式系统，研究它具有非常重要的意义。本课题中，通过筛选突变体库，获得了一份57H谷蛋白突变体，该材料胚乳内谷蛋白的57H前体增加，其谷蛋白运输途径存在缺陷，对造成缺陷的基因进行克隆，分析该基因在相关路径中扮演的角色，可以进一步为谷蛋白运输相关路径提供研究的基础。

5. 研究计划与进展

研究计划

2016年7月-12月：收获f986/dular f2植株上f2：3的种子，在培养基无菌条件下发苗收磨米鉴定f2代中极端个体，进行dna提取和ssr标记凝胶电泳，连锁分析粗定位。

2017年3月-2017年7月：基因的精细定位。