一种双特异抗体下游纯化工艺的筛选和优化开题报告

1. 研究目的与意义

研究背景

肿瘤是一种严重威胁人类健康的基因性疾病，是体细胞后天获得性dna改变导致细胞无节制地增殖，且这种增殖不断地侵袭周围正常组织所致。目前肿瘤的治疗方式主要有手术治疗、放射治疗、化学药物治疗、生物治疗四大类。良性肿瘤大多通过手术治疗治愈，而恶性肿瘤以化疗和放疗为主要治疗手段，临床应用极为广泛，但会对身体产生一定的毒副作用，给患者带来不良反应。因此生物治疗成为近年研究热点，其中的抗体靶向疗法治疗肿瘤更显示出了良好的前景。

普通的肿瘤治疗性抗体只能结合单一的抗原，其结合特异性相对较低，容易发生脱靶效应。双特异性抗体能分别识别和结合两种不同的抗原，所以它可以把免疫细胞、病毒分子等连接到肿瘤细胞上，进而增强对靶细胞的杀伤作用，同时也可以结合同一肿瘤细胞上的不同抗原以增强其结合特异性，从而减少脱靶毒性等副作用。然而，双抗的产业化具有多方面挑战，比如错配问题、双抗稳定性的保证、双抗表达量的平衡、双抗纯化后纯度问题等等都是产业化过程中值得重视的问题。

2. 研究内容和预期目标

研究内容

本课题在信达生物制药公司其他项目双特异性抗体纯化工艺研究成功的基础上，拟通过亲和层析的动态载量测定、洗脱体系筛选优化、冲洗条件筛选优化、洗脱ph范围筛选优化和离子交换层析的载量范围研究、洗脱体系筛选优化、截峰参数优化等实验，检测收集液中目的蛋白的各项指标，探讨一种新型双特异性抗体的下游纯化和筛选工艺。

预期目标

3. 研究的方法与步骤

研究方法

依据文献资料设计亲和层析实验和离子交换层析实验各个步骤的各项参数，然后通过ce sds、icief、sec法检测各步骤的收率、蛋白纯度、电荷异质性、宿主细胞蛋白残留（hcp）、外源性dna残留、蛋白a残留（protein a）指标，最后通过检测报告的图谱和数据确定工艺。

4. 参考文献

[1] 陈志朋, 王德林. 肿瘤分子靶向治疗药物的临床应用研究进展[j]. 局解手术学杂志, 2012, 21(2): 186-188.

[2] 车耀健, 赵宁宁, 胡妍, 等. 抗egfr/cd3双特异性抗体的制备与功能的初步研究[j]. 福建医科大学学报, 2017, 6: 369-374.

[3] 徐晨, 杨纯正. 双特异性抗体的制备和应用[j]. 国外医学免疫学分册, 1999(4): 18 4-188.

5. 计划与进度安排