1. 研究目的与意义
猕猴桃灰霉是严重影响猕猴桃品质的重要病害。随着猕猴桃在全国各地的生产规模逐渐扩大，猕猴桃灰霉病也日益突出。猕猴桃灰霉病是由灰霉菌(botrytis cinerea )引起的一种世界性的重要病害。灰霉病已对猕猴桃果实贮藏造成了很大的影响，且国内对猕猴桃灰霉病的研究相对较少。柑橘 citrus reticulata是柑橘类属芸香科柑橘亚科柑橘族柑橘亚族的植物，在产量和栽培面积方面中国均居世界首位。青霉病是柑橘果实采前及采后的主要病害，具潜伏侵染性，可引起贮藏期间的果实 30% ～ 50% 腐烂,但是长期使用化学农药防治柑橘青霉病，会导致果实农药残留量高，降低了柑橘的食用安全性和商品价值。
目前国内植物真菌病害防治主要依赖于化学农药，虽然化学杀菌剂在作物病害控制中起着重要作用，但长期使用对环境污染和生态平衡的破坏以及诱发植物病原真菌的抗药性也引起了人们的广泛关注。因此有针对性的筛选植物源农药，是植物病害生物防治研究的重要方面。目前，植物抗瘟性品种的利用和化学农药的使用仍是植物防害行之有效的措施，但因抗瘟品种的单一化、植物病原菌生理小种遗传的复杂性和致病性的多样性以及化学农药的毒性和病原菌的抗药性，植物抗瘟性品种和化学农药使用在生产上都受到一定的限制。
植物源农药是来源于植物体的农药（从人工栽培或野生植物中提取活性成分），其有效成分通常不是单一化合物，而是植物有机体中的一些、甚至大部分有机物质。植物源农药具有环境友好、对非靶标生物安全、不易产生抗药性、作用方式特异、促进作物生长并提高抗病性、种类多、开发途径多等特点。且从植物源农药的来源来看，作为自然界自身长期存在的一类天然产物，在长期进化中，植物源农药中的有效成分在进入环境后有其自然降解途经和规律。因此很多学者均认为该类农药是一种环境友好型农药，在环境中易降解、对非靶标生物安全、低毒和无污染。近10余年来，国内学者筛选的范围进一步扩大，同时更加注重对植物源物质特殊生物活性的发现。除了常见5大类植物激素外，研究人员陆续发现了许多其他类生长调节类物质，如油菜素内酯、茉莉酸、寡糖素、水杨酸、系统素、膨压素、多胺、玉米赤霉烯酮等，他们或参与对植物生长和发育的调控，或是作为一种信号激素参与植物对外界胁迫的适应过程。还值得提及的是以植物材料为基础的植物源药肥，不仅具有营养作用，还兼具杀虫、防病、改善土质等多重效果。吴传万等利用苦豆子和牛心朴子残渣混配加以改造后研发出兼具营养、改良土壤、防虫抑菌等多功能于一体的新一代生态环保型药肥，并获得发明专利授权（zl200710026023.x）。施用该药肥后，花生植株明显增高、抗倒伏，且增产9.4%～11.5%，还不同程度的增加了土壤中细菌、真菌和放线菌的数量。植物药肥既可防止化肥所带来的土壤板结等问题，又可有效控制目前农业生产中难以解决的土传和种传病害，是发展无公害农业和出口创汇农产品的有力武器，具有十分广阔的市场开发前景。
2. 研究内容和预期目标
| 研究内容 1. 不同浓度油茶粕提取物对柑橘青霉菌和猕猴桃灰霉菌菌丝生长的抑制作用 2. 油茶粕提取物抑制柑橘青霉菌和猕猴桃灰霉菌的生理生化指标的测定 预期目标 1．不同浓度油茶粕提取物对柑橘青霉菌和猕猴桃灰霉菌菌丝生长有抑制作用。 2．油茶粕提取物引起柑橘青霉菌和猕猴桃灰霉菌的菌丝发生不同程度的断裂。 3．油茶粕提取物对柑橘青霉菌和猕猴桃灰霉菌的生理生化指标有影响。 |
3. 研究的方法与步骤
1 材料
1.1供试油茶粕：江西地道油茶下脚料油茶粕
油茶粕提取物的制备：称取事先打去脂的油茶粕粉末10 g左右，放于250 ml磨口圆底烧瓶中，加入150 ml乙醇，80 ℃左右回流3~4 h。经8层纱布过滤后，滤液倒入大培养皿中，保鲜膜密封后置于-80 ℃冰箱冷冻过夜。第二天将冷冻后的滤液取出，在保鲜膜上戳洞透气，迅速放于冷冻干燥机中处理48 h，得水提取物。
4. 参考文献
| 4．本课题主要参考文献 |
| [1] 陈楚英,彭旋,陈玉环,等.21种药用植物提取物对柑橘青霉病抑菌作用的筛选及白薇醇提物对脐橙青霉病的防治效果[J]. 植物保护学报,2016, 43(4) : 614-620 [2]李晓梅,王艳龙,肖飞,等.柑橘青霉病的发生与生物防治研究进展Agricultural Science Technology, 2017, 18(1): 172-175 [3] 黄伟, 万明长, 乔荣. 贵州猕猴桃产业发展现状与对策[J]. 贵州农业科学, 2012, 40(4): 184-186. [4] 李诚, 蒋军喜, 赵尚高, 等. 猕猴桃灰霉病病原菌鉴定及室内药剂筛选[J]. 植物保护报, 2014, 40(3): 48-52 [5] 刘双清, 张亚, 廖晓兰, 等. 我国植物源农药的研究现状与应用前景[J]. 湖南农业科学, 2016 (2) : 115- 119 [6]王烨,郭晓强,高贵田,＊气体CLＯ２对猕猴桃青霉的抑菌作用及其机理[J]. 陕西师范大学学报（自然科学版） [7] 何军, 马志卿, 张兴. 植物源农药概述[J]. 西北农林科技大学学报, 2006, 34(9) : 79- 85 [8] Isman M B, Botanical insecticides. deterrents,and repellents in modern agriculture and an increasingly regulated world[J]. Annual Review of Entomology, 2006, 51: 45-66 [9] Akhtar Y, Yeoung Y R, Isman M B. Comparative bioactivity of selected extracts from Meliaceae and some commercial botanical insecticides against two noctuid caterpillars, Trichoplusia ni and Pseudaletia unipuncta[J]. Phytochemistry Reviews, 2008, 7(1): 77-88 [10] 张兴, 吴志凤, 李威, 等. 植物源农药研发与应用新进展—特殊生物活性简介[J]. 农药科学与管理, 2013, 34(4) : 24-31 [11] 程光辉, 丁伟. 新型天然产物植物生长调节剂研究进展[C]. 中国植物保护学会学术年会, 2006, 6 [12] 毕军, 夏光利, 毕研文, 等. 植物源药肥的研究及开发应用前景[J]. 中国农学通报, 2005, 21(3) : 272- 274 [13] 吴传万, 刘凤淮, 杜小凤, 等. 一种防治线虫和地下害虫之生态药肥的研发[J]. 中国农学通报, 2008, 24(6) : 358- 361 [14] 张兴, 马志卿, 冯俊涛, 等. 植物源农药研究进展[J]. 中国生物防治学报, 2015, 31(5) : 685- 698 [15] 龚吉军, 黄卫文, 钟海雁, 等. 油茶粕多肽对小鼠免疫调节功能的影响[J]. 中国食品学报, 2013(12) : 21- 27 [16] 张宽朝, 马皖燕, 文汉. 油茶籽多糖降血糖作用的初步研究[J]. 食品工业科技, 2014(2) : 337- 339 [17] 郝卫宁, 曾勇, 胡美英, 等. 茶皂素在农药领域的应用研究进展[J]. 农药, 2010, 49(2) : 90- 93,96 [18] 袁英姿, 曹清明, 钟海雁, 等. 油茶籽多酚对茶油的抗氧化性的研究[J]. 食品工业科技, 2009(6) : 103- 105 [19] 侍银宝, 钟海雁. 油茶果皮多酚粗提物对DNA氧化损伤的影响[J]. 食品与机械, 2013, 29(6) : 143- 146 [20] 王徐卿, 沈建福, 王敏, 等. 油茶籽饼多酚的乙醇提取工艺优化研究[J]. 浙江林业科技, 2007, 27(3) : 41- 43 [21] 王玉春. 茶多酚的提取方法及应用研究进展[J]. 甘肃联合大学学报:自然科学版, 2008, 22 (3) : 51- 52 [22] Zhao Hai-fng, Dong Jian-jun, Lu Jian, et al. Effects of extraction solvent mixtures on antioxidant activity evaluation and their extraction capacity and selectivity for free phenolic compounds in barley[J].Journal of Agricultural and Food Chemistry, 2006, 54(19):7277-7286 [23] 蒋林艳, 王林果, 欧熳熳. 茶油抑菌效果的研究[J]. 安徽农业科学.2008, 36(14) : 5913- 5914 [24] 易磊, 霍光华, 韩启灿, 等. 木荷皂甙对真菌细胞形态及生理生化指标的影响[J]. 植物保护学报, 2013, 40(5) : 450- 456 [25] 汪金莲, 邱业先. 茶多酚对真菌的抑制作用及抑菌机理[J]. 天然产物研究与开发. 2011, 23: 918- 922 |
5. 计划与进度安排
1、2022年2月20日～2022年3月10日，接受任务、查阅和翻译文献，撰写开题报告；
2、2022年3月11日-2022年3月20日，完成实验前准备工作，配制各实验所需药品；
3、2022年3月21日～2022年4月11日，制备油茶粕粗提取物；
