乳腺癌中RSK调控AKT通路诱导EMT的作用机制研究开题报告

1.研究背景

1.1．癌症

癌症，因其高发病率和高死亡率，严重危害人民群众的身心健康。仅以乳腺癌为例，我国每年大约新增乳腺癌患者27.9万例，位居女性肿瘤发病率首位。虽然乳腺癌患者的5位存活期已提升至80%左右，但与欧美发达国家相比，仍有较大的提升空间。因此，深入研究了解乳腺癌中的原癌基因及其作用机制，有利于新型抗乳腺癌药物和治疗手段的开发。

1.2．RSK2

核糖体S6激酶2（Ribosomal S6kinase， RSK2），属于Ras-MAPK下游通路的90kDa的RSK家族，RSK2被磷酸化后，被转入到细胞核中磷酸化多种核蛋白，参与调控细胞的增殖、周期、转化等过程。大量研究表明，RSK2在多种恶性肿瘤及组织中较正常细胞及组织明显偏高。但其在乳腺癌中的作用机制尚不完全清楚。

1.3．上皮间质转化（EMT）

上皮-间质转化（EMT）机制一直以来都是探讨恶性肿瘤转移的热点话题。EMT 在 1982 年被首次报道，Greenburg等在体外试验中证实在特定的生理、病理状况下，上皮细胞会暂时失去极性，表现出间质细胞所具有的迁移特征，即上皮细胞出现细胞极性丧失、黏附能力下降及细胞拉长等间质表型特征。研究表明，EMT与乳腺癌的侵袭转移显著相关，乳腺癌细胞通过 EMT 获得转移迁移能力，侵袭周围或远处组织，成为转移性肿瘤。因此研究RSK2对乳腺癌细胞EMT过程的调控机制，将为针对EMT靶向治疗提供新的理论基础。

2．研究目的及意义

本实验的研究目的是研究RSK2调控乳腺癌细胞EMT过程的作用机制，为目前乳腺癌的治疗手段及相关药物的开发探寻新的靶标和思路。

3.1. 研究技术：

RNAi、细胞转染、western blot、基因芯片等。

3.2. 步骤：

1) 设计合成RNAi载体；

2) 用脂质体包裹的方法将载体转染进入乳腺癌细胞株MCF-7；

3) 用G418对转染细胞进行筛选，得到稳定转染细胞株；

4) 进行transwell实验；

5) 裂解蛋白，western blot检测RSK2、AKT、p-AKT等蛋白含量变化。

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