1. 研究目的与意义
在碳水化合物研究领域,稀有糖逐渐被认为在人们膳食与健康中具有重要的功能。其中D-构型稀有糖或糖醇由于具有良好的风味、低卡路里、不易消化、抗龋齿、控制血糖及有利健康等功能,正被开发利用为功能性糖和传统甜味剂的替代品,如木糖醇、D-塔格糖、D-阿洛酮糖等;L-构型糖缺乏风味,但通常被用作各种化学产品、药品的生产原料和其他用途。稀有糖的生理功能研究将是未来人们研究的热点,随着科技的不断发展,人们的认识逐渐提高,稀有糖的功能将不断被发掘和利用。
l-核酮糖不仅可以用作合成具有不同生物活性的化合物的前体,同时本身也具有一些特殊的功效。l-核酮糖可以作为合成抗病毒药物的中间体,优化合成l-核酮糖的途径对医药业的发展有重要作用。但由于l-核酮糖在自然界中十分稀有,且目前不能像d-果糖和d-阿洛酮糖等功能性单糖那样进行较大批量的生产,因此价格极高,难以获得,长期以来供不应求,亟需设计出合理的生物催化途径来进行工业化生产,以适应将来日益增长的市场需求。本实验致力于筛选鉴定催化l-核糖能力强的菌株并对其生物催化过程进行优化。
l-核酮糖的合成研究目前已经取得了较好的进展,其合成方法主要有化学合成法和生物合成法。生物合成法中由于生物酶催化过程的反应温和、催化效率较高、以及酶催化转化过程制备的产品光学纯度高等原因,生物法制备l-核酮糖在未来将会有更好的应用前景。
2. 研究内容和预期目标
本论文研究主要内容如下:
(1)参考文献,利用l-核糖作为单一碳源筛选出菌株;
(2)菌株活化,利用16srrna法检定菌种;
3. 研究的方法与步骤
1.采用分子生物学的方法对菌株进行鉴定
保藏在冷冻干燥管中的菌体在无菌条件下接入适合于菌丝生长的培养基中,30℃,200rpm/min摇瓶培养72h。
收集培养72h的种子培养基,离心后取上清液,用孔径为0.22m的针头式过滤器过滤,采用细胞破碎法提取dna,形成cdna文库,经过pcr扩增获得16srrna片段,将片段回收后提取dna,测定dna浓度,并进行测序,查询ncbiblast确定该菌种。
4. 参考文献
[1]李良智,芮新生,万屹东。微生物及其酶法生产稀有l-戊糖。化工进展,2007,26(5):750-753。
[2]kazuyao,synthesisandpharmaceuticalapplicationofl-ribose,tetrahedron,2009,65(10):1937-1949.
[3]helantom,kiviharjuk,granstrmt,etal.,biotechnologicalproductionofl-ribosefroml–arabinose,applmicrobiolbiotechnol.,2009,jan17.[epubaheadofprint]
5. 计划与进度安排
1.2022年12月,接受任务,文献调研阅读
2.2022年2月,开题报告,英文文献翻译
3.2022年3月1日-2022年3月31日
