1. 研究目的与意义
研究背景
随着纳米技术的迅速发展,越来越多的纳米材料被应用于医学、生物技术、工业和日常生活的各个领域。纳米二氧化铈因其独特的理化性质,应用范围也越来越广。尤其,近年来有比较多的研究证明纳米二氧化铈在医疗和医药方面有很高的潜在应用价值。在纳米二氧化铈被广泛应用的同时,因其应用而产生的安全性问题也引起了很多科研工作者的注意。纳米二氧化铈不仅存在于空气、水环境等常规环境中,当被用在医疗和医药领域时,就会通过医用途径进入人体。
纳米二氧化铈通过各种途径进入机体后,可随血液循环到达机体的各个组织,包括肝、肾、心脏、脑、睾丸等器官,并可引发这些器官的毒性效应。如今,关于纳米二氧化铈的细胞毒性研究也是一大热点,纳米二氧化铈对细胞产生的毒性也不尽相同。已有研究报道纳米二氧化铈对不同的细胞系产生不同的细胞毒性。纳米二氧化铈的细胞毒性可表现为诱导氧化应激、损伤细胞膜等。纳米二氧化铈还可引起炎性因子的分泌、DNA损伤、细胞形态受损,同时诱导细胞凋亡。
2. 研究内容和预期目标
研究内容
在本实验室前期对纳米铈不断研究的基础上,本研究以体外培养的小鼠睾丸间质作为研究对象,应用mtt法测定不同纳米铈处理浓度下的细胞活性已得到纳米铈的ld50、通过酶联免疫吸附法检测上清中生殖激素睾酮的分泌量、利用fluo 8/am染色法通过流式细胞仪检测细胞内ca2 浓度,通过这一系列参数探讨纳米氧化铈对体外培养的睾丸间质细胞的影响。
预期目标
3. 研究的方法与步骤
一、 研究方法
依据文献资料设计一系列纳米氧化铈的浓度,采用mtt法测定不同浓度下的细胞活性以确定合适的纳米氧化铈浓度;继而采用酶联免疫吸测定不同浓度纳米铈下生殖激素睾酮的分泌量;进一步采用fluo 8/am染色并通过流式细胞仪检测细胞内ca2 浓度;最后通过spss20.0对实验结果进行显著性分析并得出结论。
二、 实验步骤
4. 参考文献
[1] m horie, k nishio, h kato,et al. cellular responses induced by cerium oxide nanoparticles: induction of intracellular calcium level and oxidative stress on culture cells. the journal of biochemistry. 2011, 150 (4): 461-471.
[2] 陈陵,赵学成,邓琼,孙丽丽,李俊,李伟,冯昶. 纳米氧化铈急性染毒对雄性小鼠体重和脏器系数及血常规的影响. 环境与健康杂志. 2010, 27(10): 899-892.
[3] 赵海军,王宝贵,张桂英,张惠,周静. 硝酸亚铈对小鼠睾丸细胞酶活性和精子数量及质量的影响. 中华预防医学杂志. 2008,9(11): 956-957.
5. 计划与进度安排
1、2022-02-18~2022-03-10 查阅资料写开题报告2、2022-03-11~2022-03-27 进一步查阅资料并准备实验材料
3、2022-03-28~2022-04-16 小鼠leydig细胞预培养
4、2022-04-17~2022-05-06 纳米氧化铈添加剂量探索
