南京地区鸡场中鸡弓形虫感染情况调查开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

本课题的意义、国内外研究概况、应用前景等（列出主要参考文献）

弓形虫病(toxoplasmosis)是一种世界范围内广泛流行的专性细胞内寄生的人畜共患寄生虫病。弓形虫是1908年由法国学者nicolle于北非的一种刚第梳址鼠的体内首次发现^[1]，现广泛分布于除南极洲的外的世界各地。猫科动物是其已知的唯一终末宿主，所有的温血动物都可以作为其中间宿主。受感染的动物可向外界环境排泄弓形虫卵囊，而卵囊在环境中可存活并保留感染性达数年之久^[2]，人类接触、误食了受弓形虫卵囊污染的水源、土壤或食物，会引起弓形虫感染^[3]。人类若食用了加工不当、含有弓形虫包囊的畜禽肉、蛋，也会感染弓形虫^[4]。

目前国内外对人、猫、家畜的弓形虫病调查研究较多。弓形虫感染除了与流产或者临床疾病，和做过器官移植手术、aids病患者这一类有免疫缺陷病的人有关的先天性遗传病外，通常不表现临床症状^[5-7]。在孕妇会引起流产、早产、死胎、畸胎或产智障儿，在儿童中主要是引起眼弓形虫病、先天性心脏病和智残儿等。世界人口中感染弓形虫的情况因地而异，但总体情况不容乐观。有报道称^[8]，在美国和英国,有大约16%-40%的人口感染弓形虫，而在拉丁美洲和欧洲，50%-80%的人体内检测到弓形虫特异性抗体。宠物被感染常表现为免疫力低下，生长缓慢，消瘦，贫血等，严重时可导致死亡^[9]。国外对鸡的弓形虫感染流行病学调查较多，但国内相关研究较少。dubey等人^[10]近年来对鸡的弓形虫病进行了调查并成功分离到弓形虫。鸡作为保虫宿主,在弓形虫感染和生活周期中也起着重要作用。被猫粪中弓形虫污染的环境中有多少弓形虫卵囊可通过该地地面散养鸡的感染情况反映出来^[11]。所以通过对南京地区鸡场鸡弓形虫的污染情况调查，可以为为制订鸡弓形虫病防治策略和措施提供科学依据。

2. 研究的基本内容和问题

研究的目标、内容和拟解决的关键问题

1.1研究目标

本研究的目的是调查南京周边地区鸡场中弓形虫的分布情况，为制订鸡弓形虫病防治策略和措施提供科学依据。

3. 研究的方法与方案

研究方法、技术路线、实验方案及可行性分析

2.1 研究方法

2.1.1 土壤中的弓形虫DNA提取方法

2.1.2 普通PCR方法

2.1.3 琼脂糖凝胶电泳技术

2.1.4 间接ELISA法

2.2 技术路线、实验方案

2.2.1技术路线

路线见下图

4. 研究创新点

特色或创新之处

2.3 可行性分析

2.3.1 项目指导教师及学科组长期进行pcr、elisa检测弓形虫方法的研究，对相关背景知识相当熟悉，并有研究生协助和指导试验，可为本项目的实施提供良好的技术指导。

5. 研究计划与进展

研究计划及预期进展

2014年2月至3月 查阅相关文献和资料，并熟悉相关技术的操作，如dna提取方法，pcr方法，琼脂糖凝胶电泳，间接elisa法等，同时采集鸡场的土样。

2012年3月至4月 对采集的鸡场土样，提取其中的鸡弓形虫dna，并用pcr进行扩增，通过琼脂糖凝胶电泳，对结果进行分析。