猪圆环病毒2型毒株的分离与鉴定开题报告

 2023-02-18 09:02

1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)

1.1 课题意义

猪圆环病毒2型(porcine circovirus type2,pcv2)在我国规模化养猪场中广泛存在,与猪群中发生的多种疾病相关,主要包括断奶仔猪多系统衰竭综合征(pmws)、猪皮炎肾病综合征(pdns)、怀孕母猪流产以及仔猪a2型先天性震颤(ct)等[1],是我国养猪业三大疫病之一,也是全球公认危害养猪业的重要疾病[2],给我国养猪业造成巨大的经济损失[3]。本研究将pcv2病毒感染pk15细胞,并连续传代,从而获得可体外培养的pcv2毒株,对病毒的相关研究及疾病预防具有重要意义。

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2. 研究的基本内容和问题

2.1 研究目标

获得可在体外稳定传代的pcv2毒株。

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3. 研究的方法与方案

3.1 研究方法

本课题涉及到的研究方法有:细胞培养、病料处理、病毒接种、病毒培养、病毒dna提取、pcr检测、荧光定量pcr检测、pcv2全基因组扩增及测序以及序列分析等技术。

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4. 研究创新点

获得能够在PK15细胞上稳定传代,且病毒滴度较高的PCV2毒株用于免疫原性研究,通过毒株筛选和改变培养条件解决PCV2体外培养滴度较低的问题,为高效PCV2疫苗的研发奠定基础。

5. 研究计划与进展

第一阶段(2018.9~2018.10)熟练掌握pk15细胞培养技术、病毒dna提取技术、pcr检测技术、荧光定量pcr检测技术;

第二阶段(2019.1~2019.3)处理pcv2阳性病料,接毒,带毒传代,检测,获得可稳定传代且病毒效价较高的pcv2毒株;

第三阶段(2019.3~2019.4)全基因组序列测定;

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