亚洲百合‘达诺’45SrDNA FISH分析开题报告

1. 研究目的与意义

百合是世界重要的鲜切花之一，有2 000 余年栽培历史，具有较高的经济和观赏价值。百合属于无性繁殖的球根类花卉，遗传杂和程度高、背景复杂，基因工程研究难度较大，起步较晚，20 世纪90 年代中期才逐渐发展起来。近年来随着分子生物技术的发展，与百合相关的基因克隆和遗传转化研究受到世界花卉育种学家的普遍重视。

利用基因工程手段对植物进行定向改造，已成为当今植物育种学发展的一个新领域，植物基因工程操作离不开植物基因组总DNA的制备，利用荧光原位杂交技术对百合DNA的分析研究，有利于在分子水平上对百合进行品种鉴定和开展进一步的选育工作。

2. 国内外研究现状分析

DNA原位杂交(in situ hybridization，ISH)是一项利用标记的DNA探针直接在染色体、间期核和DNA纤维定位特定靶DNA序列的技术，它将基因组的DNA序列组成和染色体、间期核的结构与组织直接关联起来。这项技术创建于20世纪60年代末。1985年这项技术被引进到植物。在非放射性原位杂交中，杂交位点可通过免疫酶联反应或荧光素来检测，其中通过荧光素检测杂交位点的原位杂交称为荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridiza．tion，简称FISH)。与通过免疫酶联反应检测的原位杂交技术相比，FISH技术的程序简单、灵敏度高、对比明显、可同时检测多个探针。这些优点使之迅速成为原位杂交的主流技术。

FISH技术在植物基因组分析中主要有以下几个方面的应用。1、物理定位DNA序列，并为染色体的识别提供有效的标记。2、对相同DNA序列进行比较物理定位，探讨基因组的进化。3、构建植物基因组的物理图谱。4、揭示特定染色体区域的DNA分子组织。5、分析间期核中染色质的组织和细胞周期中染色体的动态变化。

3. 研究的基本内容与计划

内容：

（1）方案拟定：在了解根尖的固定、预处理、制片及杂交过程后根据具体情况拟定可行的方案。

（2）实验数据采集与处理：该论文主要是细胞学照片的拍摄，并对染色体测量排列。

4. 研究创新点

对市场上的百合商品种进行细胞遗传学研究，为进一步百合商品种研究打下基础。