重组Tau蛋白及片段的原核表达与纯化研究开题报告

 2021-08-14 02:08

1. 研究目的与意义(文献综述)

随着世界老龄人口的增多,老年性痴呆作为影响老年人生活质量和生命的主要疾病之一,已成为医学领域的研究热点。

微管系统是神经细胞骨架成分,可参与多种细胞功能。

微管由微管蛋白及微管相关蛋白组成,tau蛋白是含量最高的微管相关蛋白。

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2. 研究的基本内容与方案

基本内容:
毕业设计的主要目标是基于优化和合成的tau蛋白序列,构建片段突变体,在大肠杆菌中进行表达,并对其表达温度,诱导时间进行优化,再利用亲和层析方式进行纯化,从而得到大量的纯化tau蛋白,进行下一步的体外功能测试。

先用氯化钙法制备bl21感受态细胞,保存用于后续的诱导表达。

对购买的质粒进行诱变,构建表达片段突变体的质粒载体。

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3. 研究计划与安排

第1-2周:了解论题,认识所需完成的主要内容和任务;搜集相关学术期刊、论文、文稿、专利、教材等资料,阅读后进行总结,对论题形成一个初步的系统性的认识。

第3-4周:完成毕业论文开题报告,确定实验技术路线,确定添置实验所需的材料、仪器和试剂。确定具体的实验方案和步骤。

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4. 参考文献(12篇以上)

[1]barghorn,s.,j.biernat,e.mandelkow. purification of recombinant tau protein and preparation

of alzheimer-paired helical filaments in vitro[j]. methods in molecolar bioiogy,2005,(299):35-51

[2]houck al,hernández f,ávila j. a simple model to study tau pathology[j].journal of experimental neuroscience,2016,10:31-38
[3]khan ss,bloom gs. tau: the center of a signaling nexus in alzheimer's disease[j].frontiers in neuroscience,2016,10:31

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