1. 研究目的与意义(文献综述)
研究背景:水华束丝藻是一种丝状蓝藻,在世界性富营养化水体中会快速繁殖,是淡水水华蓝藻中常见的优势种。在我国,束丝藻在水体中十分常见,其中以滇池的束丝藻水华最为受到关注,几乎每年滇池都会出现束丝藻与微囊藻交替的水华现象。水华束丝藻会分泌一种毒性极强的生物碱类神经毒素,这类毒素毒性大、作用时间短,且一般中毒后无对症的治疗药物和方法,对环境安全和人体健康产生严重的影响。
鱼是水生生态系统中一个重要的不可或缺的一部分,因而适合用来评估有害的自然或外源性化学物质对淡水生态系统的压力和影响。斑马鱼是淡水脊椎动物中的重要模式生物,其具有体型小、繁殖速度快、便于养殖管理、试验周期短等优点,并且有典型的脊椎动物神经递质,其神经内分泌系统能为应激反应提供强有力的生理反应。且斑马鱼基因与人类基因的相似程度高达87%,对药物反应与人临床反应相似,意味着哺乳动物反应机制可以使用斑马鱼模拟。斑马鱼作为国际标准化组织(iso)推荐使用的标准化鱼类毒性试验动物,已经应用于多种有毒化学物质的生态风险评估。
行为变化是生物标志物的重要研究,通常情况下,内部和外部环境的变化都会导致一个有机体行为的变化,往往反映了动物和环境的相互作用。当动物暴露于污染环境中时,行为的变化可以作为第一防御反应,用来降低死亡率或者增加代谢维持生理平衡的机会。行为毒理学也经常作为一种方法来监测生态相关的污染物。
2. 研究的基本内容与方案
本实验以滇池水华期间(2009)采集分离的水华束丝藻为材料,藻株经实验室鉴定、分离、纯化、培养、细胞内毒素抽提和纯化,毒素含量和成分分析后,通过腹腔注射(5.3and7.61mgstxeq/kgbw作为低浓度和高浓度)对斑马鱼进行毒素处理,使用动物行为采集系统(ethovthion)在染毒后的24小时内的不同时间点(0、1、3、6、9、12和24h)进行采集并取斑马鱼骨骼肌组织,对其丙酮酸脱氢酶(pdh)(分光光度法),琥珀酸脱氢酶(sdh)(可见光分光光度计),肌酸激酶(ck)(试剂盒测定),肌糖原(mg)(分光光度法),己糖激酶(hk)(比色法),肉毒碱脂酰转移酶(cat)(分光光度法),脂酰辅酶a合成酶(acs)(分光光度法),柠檬酸合成酶(cs)(双抗体夹心法),乳酸脱氢酶(ldh)(比色法)进行测定,绘制图表,并结合斑马鱼的运动行为进行分析得出结果。
研究内容:
1)研究束丝藻毒素对斑马鱼运动行为的影响。
3. 研究计划与安排
第1周:进行准备工作,包括资料查找、筛选、阅读、讨论和立论等;
第2周:阅读并撰写出国内外相关研究内容的总结和概况,并同时翻译1篇论文主题相关的英文参考文献成中文;
第3周:设备仪器的熟悉,讨论,器具和器皿的准备,药品的准备,包括定购必要的药品等;
4. 参考文献(12篇以上)
[1]徐晓阳,冯炜权,曹建民,等.运动性低血睾酮及补肾中药对大鼠能量代谢某些指标的影响[j].中国运动医学杂志,2000,19(3):282-285.
[2]洑琴,乔丽红,唐志刚,等.胍基乙酸对建鲤生产性能、体成分及肌肉能量代谢关键酶的影响[j].中国粮油学报,2015,30(3):85-90.
[3]董文龙,樊毫军,侯世科,等.挤压伤大鼠肌肉组织间液生化指标变化研究[j].中国急救复苏与灾害杂志,2015,10(1):37-42.
