甜瓜蒂药用成分的提取及生物活性检测开题报告

1. 研究目的与意义（文献综述）

本课题旨在解决三个问题。第一，探索中药甜瓜蒂中可能存在的生物活性成分，检测甜瓜蒂中生物活性物质的含量。甜瓜蒂中已有葫芦素被证明具有抗肿瘤的效果，但其所具有的其他成分研究较少。第二，通过实验探索最优的提取条件（温度、提取溶剂的浓度、料液比、时间等）。目前，甜瓜蒂的提取工艺主要针对葫芦素，而以其他成分为目标的提取工艺并未被探索。第三，研究甜瓜蒂粗提物对细胞生长的影响，从而确定其生物活性。葫芦素b已被证明具有保肝护肝的效果，本课题将通过细胞实验验证甜瓜蒂提取物对癌细胞的抑制作用。

甜瓜蒂作为一种中药有着涌吐痰食、除湿退黄的功效，而甜瓜蒂中提取的葫芦素则被用在抗癌、护肝上。已发现的葫芦素中，葫芦素b、e应用最为广泛。其中，葫芦素b对四氯化碳造成的肝损伤有一定的保护作用^[1]。葫芦素e能够影响肝癌细胞中cdk1蛋白和p21蛋白的表达，使cdk1蛋白表达量下降，p21蛋白的表达量上升，从而使肝癌细胞的细胞周期停留于g₂/m期^[2]。随着研究的深入，葫芦素的用途也不仅仅局限于肝脏疾病。据报道，葫芦素b可以通过下调主要通路mapk和jak2/stat3和mmps来抑制人骨肉瘤细胞的增殖和转移^[3]。葫芦素e糖苷能够抑制睾丸激素诱导的小鼠实验性前列腺增生^[4]。由此可见甜瓜蒂作为中药的药用效果与它的提取物的用途有着一定的差别，这一定程度上说明了甜瓜蒂中可能存在着其他的成分从而影响了它的药用效果，这种影响可能是甜瓜蒂中的其他药用成分与葫芦素共同作用造成的也可能存在竞争或拮抗作用。所以探索甜瓜蒂中的这种作用将是对甜瓜蒂中药价值的一种开发，也是对中药利用的一种参考。

目前关于甜瓜蒂生物有效成分的提取，主要是针对葫芦素。有研究表明使用70%乙醇作为溶剂，按照提取条件：80℃，30分钟提取3次可达到最佳提取效果^[5]。除了甜瓜蒂粉末外，甜瓜蒂纤维中也有葫芦素，无水乙醇提取出的甜瓜蒂含量高于65%乙醇^[6]。因此对于甜瓜蒂这种产量较低的药材，在提取过程中应完全保留药材固体并使用尽量高效的提取方法。但是目前最新的提取方法都是对葫芦素的提取，而对其他可能的成分则研究较少。如果从另一种物质的角度去探索甜瓜蒂的提取方法，或许会有意想不到的收获。这将使进一步延伸甜瓜蒂的提取方法，同样是中药提取的另一种思路。

2. 研究的基本内容与方案

(1) 研究内容与目标

本课题将从三个目的为起点，通过文献综述与实验相结合的方式探索甜瓜蒂中生物有效成分的提取方案以及提取物的生物活性。为了衡量提取的效果，提取物中可能的生物有效成分将被检测，如多酚、黄酮、多糖、皂苷等物质。同时以甜瓜蒂所含的其他成分的角度来阐明这些物质在实现药物效果中的作用。对于提取物的生物活性，相应的细胞实验是有必要的。已有的研究表明葫芦素b和葫芦素e对肝癌等癌细胞的生长有一定的抑制作用，本课题将探索在施加总提取物的情况下癌细胞与正常细胞的生长情况。

(2) 拟采用的技术方案

3. 研究计划与安排

4. 参考文献（12篇以上）

[1] 周毅彬, 王永昌, 高鹏,等. 葫芦素e通过诱导自噬抑制人膀胱癌细胞t24的增殖. 实用医学杂志, 2019(4).

[2] 付金玉, 刘莉, 华德平. 甜瓜苦味物质及其生物合成研究进展[j]. 中国农学通报, 2019,35(8).

[3] 方宁. 葫芦素b-聚乳酸-羟基乙酸共聚物载药纳米粒的构建与药效学评价[j]. 药物评价研究, 2019(8).