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1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
课题意义：
1.茉莉酸甲酯
茉莉酸类（jas）包括茉莉酸及其衍生物，是植物激素的一种，可以调控植物抵御病虫害和病原体感染；增加植物耐受非生物胁迫的能力，包括臭氧、紫外线辐射、高温和冷冻；还调节发育的各个方面，包括根的生长、雄蕊的发育、开花和叶片的衰老[1]。以往认为茉莉酸类主要作用于提高植物的抗逆性，但最近很多研究表明茉莉酸类在植物幼苗生长，胚与种子发育，生殖器官发育，种子萌发以及叶片衰老过程中同样起着重要作用。
2. 研究的基本内容和问题
研究目标
茉莉酸甲酯对草莓幼苗生长发育的影响。
研究内容
3. 研究的方法与方案
研究方法：
①草莓幼苗形态指标的测定：
通过尺子测量地上部和地下部的长度；通过天平测定地上部与地下部的鲜重，烘干至恒重后测定干重；通过拍照记录草莓幼苗的生长情况和叶片数目；通过统计须根数目分析根系发育情况。
②花青素含量的测定：
参照张荣菲的方法，使用60乙醇溶液，其中盐酸的体积分数为0.2，且料液比1∶5（g/mL），室温水浴下振荡提取30min，再在超声功率为100W、水浴温度60℃下超声提取50min后，测定花青素含量。
技术路线
实验方案
1.培养基的配制
每升培养基称取MS粉末4.302g、蔗糖30g加蒸馏水溶解至刻度线并调节PH至5.80-5.84。每升培养基可分装4瓶锥形瓶，每瓶锥形瓶中加入1.85-1.90g琼脂。培养基分装完毕后，应及时封盖瓶口，在锥形瓶外壁贴上标签。最后经过98kPa、121℃灭菌20 min，灭菌后取出锥形瓶，让其中的培养基自然冷却凝固后再使用。每瓶锥形瓶装有培养基250ml，可倒圆形或方形平板十块。
计算后取茉莉酸甲酯母液适量，按浓度梯度稀释，分别加入5个已编号的MS培养基锥形瓶中。使得1号、2号、3号、4号、5号锥形瓶中茉莉酸甲酯浓度分别为0μmol/L、0.5μmol/L、1μmol/L、2μmol/L、4μmol/L；每个250ml锥形瓶倒制十块方形平板，做好标记置于超净台中吹干，供接下来种子播种。
2.草莓种子的处理
取若干种子置于10ml的离心管中，加蒸馏水放入55℃水浴锅中热激10min。用75％的酒精消毒3min，10％的次氯酸钠消毒8min，最后用无菌水把种子冲洗4-5次后，倒入无菌的有滤纸的培养皿中。
将处理好的种子播种到圆形平板中，每块板均匀整齐播种40-50颗，共要20块，封板后放置在黑暗恒温培养箱中。在播种后10天左右开始观察，留意种子何时露白数目最多，待其数量达到峰顶时开始下一步。
3.草莓种子的播种
筛选露白情况基本一致的种子，将筛选出的草莓种子整齐的播种于各浓度方形平板的横切线上，每块平板种10颗。播种完成后在平板正反面做好标记，并用四条封条封住平板，避免染菌。平板竖直放置于光照培养室中，使得横切线与地面平行，培养30-35天。
4.数据的测定
4.1形态指标的测定
每个处理中挑选一株最具代表性的植株，拍照记录草莓幼苗的生长情况和叶片数目。筛选掉长势不一致的的幼苗后，通过刻度尺测量每个处理的株高及根长，并统计须根数目分析根系发育情况，使用天平分别测定地上部与地下部的鲜重后，迅速装入标记好的小信封，放置于鼓风干燥培养箱中，80℃下烘干至恒重，测定干重。
4.2花青素含量的测量
4.1.1花青素的提取
新鲜草莓幼苗地上部分（蒸馏水洗涤干净并晾干表面水分）→捣碎→得到草莓幼苗浆→称取适量→加入一定量的酸性乙醇溶液为提取溶剂→称重并记录数据→室温水浴下振荡提取 30 min →在一定的水浴温度下超声提取一定时间（固定超声功率为100 W）→取出→放置至室温→补重并记录数据→离心（4000 r/min）10 min →取上清液→在 4 ℃冰箱中避光保存，备用。
4.1.2花青素含量的计算公式
A {（A510-A710）pH 1.0-（A510-A710）pH 4.5}
花 青 素 含 量（mg/g）（A×Mt×DF×V）/（e×b×m）
式中：A －吸光值；Mt －矢车菊素 - 3 -葡萄糖苷的相对分子质量－ 449.2；DF －稀释倍数；V －提取液的总体积（mL）；e －矢车菊素 - 3 - 葡萄糖苷的消光系数－ 29600；b －比色光程长度（cm）－ 1cm；m －试样质量（g）
4.1.3花青素含量的测量
固定料液比为 1 ∶ 4（g/mL），超声功率为 100 W，超声提取水浴温度为 50 ℃。称取草莓幼苗浆 5 份，每份约 10 g，准确至 0.01 g，分别置于 5 个锥形瓶中，依次加入含盐酸体积分数为 0.1、0.2、0.3、0.4、0.5 的 60 乙醇溶液 40 mL，称重并记录数据，振荡提取 30 min，再按上述超声条件提取 30 min，取出，冷却后补重并记录数据，将蓝莓提取液移入 40 mL 的离心管中，离心，精密量取上层清液 1.00 mL，分别用 pH1.0和 pH4.5 的缓冲溶液稀释到 100mL，取稀释液分别于 510 nm 处和 710 nm 处测定吸光值 A，并按照“4.1.2”项花青素含量计算公式，计算花青素得率。
可行性分析
本项目前期已经阅读过一些文献资料，做过一些相关的研究，同时也积累了一定的经验。本项目的指导教师一直从事植物激素与草莓发育的研究，有良好的工作基础及丰富的经验。
本项目在生物学实验中心进行，有良好的实验器材、实验设备。
鉴于此，本项目可行，能达到预期目标。
4. 研究创新点
特色或创新之处
研究内容具有一定的新颖性。目前，人们对于茉莉酸甲酯对植物其他方面影响的研究较多, 但对茉莉酸甲酯对草莓幼苗生长发育调节方面的研究却鲜见报道。
故本课题研究茉莉酸甲酯对草莓幼苗生长发育的影响，还能够为以后筛选茉莉酸相关的草莓突变体奠定基础。
5. 研究计划与进展
研究计划及预期进展
2018.11-2018.12：阅读文献，进行实验前期准备工作；
2018.12-2019.01：进行实验，草莓种子的筛选和播种；
