拟南芥叶肉细胞中表达DES1的材料构建和筛选开题报告

 2022-01-21 20:07:39

全文总字数:7404字

1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)

1.本课题研究意义

在拟南芥中l-cysteine desulfhydrase 1( des1,at5g28030 )是唯一一个被鉴定出位于细胞质而且能够编码l型半胱氨酸脱巯基酶(l-cysteine desulfhydrase, lcd)[1]的基因,半胱氨酸脱巯基酶是催化l-半胱氨酸脱硫化氢和氨产生丙酮酸反应的酶。硫化氢( hydrogen sulfide, h2s)被认为是继no和co之后的第三种内源性气体信号分子[2],参与植物体内各种生理反应。如:增强植物抗离子胁迫能力、增强植物耐热性、增强植物抗干旱及渗透胁迫能力、增强植物耐盐性、延缓植物衰老、调控植物气孔运动等[3,4]。硫化氢通过调控基因表达、离子通道活性等参与植物生长发育和逆境胁迫响应等过程,发现其与性氧(Ros)、no、co、ca2 ,以及脱落酸( aba) 、茉莉酸(ja)、赤霉素(ga)、生长素、乙烯等植物激素信号路径存在相互作用。研究表明,硫化氢可以对蛋白质的活性cys残基进行巯基化修饰,这可能是其参与各项生命活动的重要作用方式之一[5]。在des1突变体中施加硫化物可以延缓植株的衰老,改变自噬表型,并且改变了转录本的变化[6]。本课题选择构建在des1突变体叶肉中特异性表达des1的材料,进而筛选出能够回补硫化氢的转基因植株。为研究叶肉细胞中表达des1对拟南芥的生理生化作用奠定基础。

2.国内外研究概况

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2. 研究的基本内容和问题

1.研究目标

本课题构建在des1突变体叶肉中特异性表达des1的材料,进而筛选出能够回补硫化氢的转基因植株。

2.研究内容

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3. 研究的方法与方案

1. 研究方法

双酶切法构建载体;

农杆菌蘸花法侵染拟南芥。

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4. 研究创新点

在拟南芥中L-cysteine desulfhydrase 1( DES1,At5g28030 )是唯一一个被鉴定出位于细胞质而且能够编码L型半胱氨酸脱巯基酶(L-cysteine desulfhydrase, LCD)的基因,对植株的生长具有重要意义。但是不同部位的DES1(如保卫细胞、叶肉细胞等)对植株的影响是否相同还不清楚,研究不同部位表达DES1对植株的影响有利于我们更深入的去了解该蛋白的功能,为应用前景提供有力的支持。

5. 研究计划与进展

2018.10至2018.11

浸种、点种、种苗、构载体

2018.11至2017.12

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