Drosophila Drosha的克隆与表达开题报告

 2022-01-23 20:52:18

1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)

1 本课题研究意义

1.1 mirna的作用

小rna分子是非编码的rna分子(noncodingrna,ncrna),其控制着真核细胞的许多功能,影响基因表达、细胞周期和个体发育等多种行为[1]。小rna主要包括微rna(microrna,mirna)和小干扰rna(shortinterfering rna,sirna)两类[2],其中mirna成为继sirna之后新的研究热点之一。mirna是一类长度很短的非编码调控单链小分子rna,长度约21~22个核苷酸(少数小于20个核苷酸),能够通过与靶mrna特异性的碱基配对引起靶mrna的降解或者抑制其翻译,从而对基因进行转录后表达的调控[3]。mirna由一段具有发夹环结构的长度为70~80个核苷酸的mirna前体(pre-mirna)剪切后生成。它通过与其目标mrna分子的3端非编码区域(3-untranslatedregion,3utr)互补导致该mrna分子的翻译受到抑制[4]。mirna基因以单拷贝、多拷贝或基因簇等多种形式存在于基因组中,而且绝大部分定位于基因间隔区,其转录独立于其他基因,并不翻译成蛋白质,而是具有调节其他基因表达的活性,在生物发育过程中发挥着要作用,可能对基因功能研究、人类疾病防治及生物进化探索具有重要意义。

剩余内容已隐藏,您需要先支付后才能查看该篇文章全部内容!

2. 研究的基本内容和问题

研究的目标、内容和拟解决的关键问题

研究目标:

将drosha的片段完整克隆出来并连接到表达载体ptopo上,最后将其表达成蛋白并在时间允许的情况下检测蛋白活性。

剩余内容已隐藏,您需要先支付后才能查看该篇文章全部内容!

3. 研究的方法与方案

研究方法:

主要采用基础的分子生物学手段,包括pcr、核酸电泳、连接、转化、western blot等。

技术路线:

剩余内容已隐藏,您需要先支付后才能查看该篇文章全部内容!

4. 研究创新点

该实验虽然只是克隆、表达一个基因,但因为实验材料有突变,故在做PCR的同时还需要设计正确的引物矫正突变;在实验手段上,采用了Quick Change等前沿的方法矫正突变。

5. 研究计划与进展

本课题从2016年10月开始,预计2017年4月结束全部实验。具体安排如下:

2016年10月-2017年1月,完成Drosophila Drosha的载体构建;2017年1月-2017年4月,完成Drosophila Drosha蛋白的表达。

剩余内容已隐藏,您需要先支付 10元 才能查看该篇文章全部内容!立即支付

发小红书推广免费获取该资料资格。点击链接进入获取推广文案即可: Ai一键组稿 | 降AI率 | 降重复率 | 论文一键排版