1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
火鸡疱疹病毒（hvt）（或 meleagrid 疱疹病毒 1） 是一种无致病性的α 疱疹病毒，最初于 20 世纪 60年 代末期从火鸡体内分离得到。
hvt fc-126株作为原型md疫苗自1970年以来 一直使用，该疫苗无致瘤性，保护效果良好，可以冻 干，使用方便，而且与其它疫苗株联合使用(如hvt sb-1，hvt cvi988)时表现出明显协同保护效果，使得其在控制 md 上具有重要价值。
hvt 疫苗在全球范围内的广泛使用，极大地降低md 带来的经济损失。
2. 研究的基本内容和问题
研究目标：以HVT Fc-126株为病毒载体构建病毒全基因组感染性细菌人工染色体（HVT BAC）研究内容：通过将加压筛选标记基因 gpt和BAC的载体功能序列插入到HVT 基因组中的复制非必需区，解决了细胞 结合型重组病毒的筛选以及电转化获取 BAC 分子克 隆化病毒的困难。
拟解决的关键问题:gpt基因与BAC载体连接位点的选择
3. 研究的方法与方案
研究方法利用基因重组技术与细菌人工染色体技术，对hvt基因进行改造。
实验方案1、pcr引物的设计 根据genbank上发表的hvt fc126株全长基因组序列（af291866） 、pn1-gpt 质粒序列及 pbelobac11 序列设计pcr引物。
2、 重组病毒转移载体（gpt表达盒）的构建以hvt fc126株 dna作为pcr模板，用设计的引物扩增 hvt fc126 株 us2 基因两侧的左、右同源臂 a(核苷酸序列位于 137758~139758) 和 b(核苷酸序列位于 140762~143442)，大小分别为2.0 kb和2.7kb，定向克隆到 pgem-t 载体上，获得的质粒命名为 pgab；以 pn1-gpt 质粒为模板，pcr 扩增出两侧带有 paci 酶切位点的 gpt 表达盒，经pacⅠ酶切后回收，克隆到pgab的pacⅠ位点，构建出质粒 pgab-gpt；pbelobac11 质粒经 hindⅢ酶 切后回收，克隆到质粒 pgab-gpt 的 hindⅢ位点，最 终获得重组病毒转移载体 pgab-gpt-bac11。
4. 研究创新点
特色或创新之处以hvt fc-126株为病毒载体构建病毒全基因组感染性细菌人工染色体（hvt bac），解决了在真核细胞中的重组操作局限性。
并可用作为新型疫苗载体，研制多种疫苗。
目前，国外已成功地利用hvt作为载体表达了多种禽病原保护性抗原基因，新城疫病毒（ndv），血清一型mdv,传染性法氏囊病毒（ibdv），传染性喉气管炎病毒（iltv），禽白血病病毒（alv），以及艾美尔球虫病（eimeria）的保护性抗原都已在hvt载体中获得表达，而且能抵抗致死剂量病原的感染，免疫效果良好，因此以hvt为载体的基因工程疫苗的研究具有广泛的应用前景。
5. 研究计划与进展
研究计划及预期进展2015.7.20-2015.7.29：了解实习内容，熟悉试验流程，学习试验方法，练习试验操作，撰写开题报告。
2015.7.30-2013.8.25：火鸡疱疹病毒（HVT）基因序列的获得2015.8.25-2016.4.13：重组病毒转移载体（gpt表达盒）的构建 2016.4.14-2016.4.27：重组病毒的构建 2016.4.30-2016.5.11：BAC 分子克隆化病毒的获得2016.5.14-2016.5.20：总结试验数据、试验结果，撰写毕业论文。
