1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
癌症是影响我国居民健康的主要慢性病之一，位列我国城市死因第一位，农村死因第二位。
我国在癌症治疗方面形势严峻。
传统药物治疗方法上，虽然对癌细胞的杀伤效果很好，但对健康体细胞的杀伤能力也不容小觑，所以常常伴有严重的副作用。
2. 研究的基本内容和问题
1项目研究目标通过马陆转录组测序，基因比对分析，找到可能丝氨酸蛋白酶抑制剂超家族的基因序列基因克隆，利用从马陆毒腺中提取的rna片段反转录再pcr扩增出目的基因得到相关基因序列，构建质粒通过原核表达出蛋白质，并测定出其对肿瘤细胞的作用。
2内容（1）从马陆毒腺中提取rna片段，通过反转录法得到其cdna文库。
根据已知丝氨酸蛋白酶抑制剂基因序列设计级联pcr引物，以得到的马陆毒腺cdna文库为模板，pcr扩增丝氨酸蛋白酶抑制剂基因片段并加入甲酸切割位点和酶切位点，连接到表达载体中，转入进感受态细胞，送生物公司测序。
3. 研究的方法与方案
研究方法与实验方案:1.马陆丝氨酸蛋白酶抑制剂表达菌株的构建2.目标蛋白的分离纯化3.丝氨酸蛋白酶抑制剂活性检测技术路线：提取马陆毒腺中的总rna → 毒腺cdna双链的合成 → cdna文库的筛选 → 丝氨酸蛋白酶抑制剂的原核表达 → 丝氨酸蛋白酶抑制剂的功能检测可行性分析：项目组指导教师在天然活性物质的开发与利用方面积累了丰富经验，实验技术方法成熟，已发表多篇相关文章。
本项目的研究计划已经划分，步骤详细切实可行，工作量适中，可以在一年内完成课题，并完成结题报告。
项目组依托南京农业大学生命科学学院动物生物化学实验室，具备本项目实施所需的各种实验技术方法及实验设备，实验条件成熟。
4. 研究创新点
目前从某些节肢动物如蜘蛛、蜈蚣、蝎子等毒液中分离出来具有明显抑癌作用但对健康细胞和免疫系统没有毒副作用的肽类成分。
但关于马陆的研究仍不甚完善。
马陆毒液中也含有和蜘蛛、蜈蚣和蝎子毒液类似的肽类毒素，这些肽类毒素也可能具有同样的活性。
5. 研究计划与进展
研究计划：2016年1月表达载体构建2016年3-4月 蛋白表达、分离和纯化 2016年5月蛋白活性测定预期进展（1）马陆cdna文库的构建（2）经过基因克隆、原核表达及功能检测，得到一类高效的丝氨酸蛋白酶抑制剂。
（3）通过对该类丝氨酸蛋白酶抑制剂的结构与功能之间关系的研究，为相关的药物设计提供一定的参考。
（4）得到了一类高效特异的丝氨酸蛋白酶抑制剂，后期对其相关疾病的模型进行进行药物评价。
